實(shí)驗(yàn)的所有步驟都必須經(jīng)過優(yōu)化，以便觀察到特異染色，并盡可能減少非特異的背景染色。這包括開展預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定每個(gè)一抗的適當(dāng)孵育條件。抗原親和純化的多克隆抗體的稀釋度通常低于單克隆抗體，但這些值必須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。
注意：為了獲得可靠特異的信號(hào)，應(yīng)采用交叉反應(yīng)性極少的高質(zhì)量抗體。
1、一抗孵育的起始條件：

2、一抗孵育的優(yōu)化：
   一抗?jié)舛?、稀釋液、孵育時(shí)間和溫度都影響了染色質(zhì)量。這些變量需要針對(duì)每個(gè)抗體和樣品來優(yōu)化，以便實(shí)現(xiàn)特異染色和低背景。優(yōu)化通常是保持孵育時(shí)間和溫度不變，而改變抗體濃度，以確定何時(shí)獲得*信號(hào)和低背景噪音。例如，如果使用高親和力的抗體，那么相對(duì)較高的濃度可能需要較短的孵育時(shí)間。相反，較低的抗體濃度可能需要較長的孵育時(shí)間。人們通常采用較長的孵育時(shí)間，以確?？贵w*滲透到體視學(xué)技術(shù)所用的組織切片。為了促進(jìn)特異染色，較長時(shí)間的孵育通常在低溫下開展（即4°C vs 室溫）。
    上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司坐落于美麗的上海，于2008年成立，是一家生物技術(shù)企業(yè)，主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)及銷售。主要產(chǎn)品有進(jìn)口BIM/RD/TSZ ELISA試劑盒、NQBB/GIBCO/HYCLONE 血清、ABCAM抗體、SIGMA/SPECTRUM/AMRESCO 生物科研試劑、USP標(biāo)準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)耗材等。公司自成立以來一直以質(zhì)量求生存，以信譽(yù)求發(fā)展的精神，精益求精，力求做到更好，全體員工孜孜不倦為國內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供的產(chǎn)品服務(wù)！