国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術中心>工作原理>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

講述蛋白酶K的特點及其分類

來源:愛必信(上海)生物科技有限公司   2018年05月09日 13:00  
  蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現(xiàn)的問題,并能達到理想的染色效果。
 
  蛋白酶K的應用比較廣泛,它可以消化包圍靶DNA蛋白,因此使用蛋白酶K能夠增加探針 與靶核酸結合的機會增強雜交信號,但在使用蛋白酶K時要主要使用的濃度,過高或者過低都會破壞細胞的結構、核消失等影響試驗結果。
 
  蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶,蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml.在較廣的pH范圍內(pH 4-12.5)均有活性。推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。
 
  蛋白酶K配制標準:20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinase K):將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃.蛋白酶K的保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融,有效保證12月.孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時.

免責聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
  • 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
永定县| 邵东县| 澎湖县| 永和县| 阳东县| 通州区| 嵩明县| 榆中县| 温泉县| 金堂县| 承德县| 湖州市| 织金县| 嵊州市| 乳山市| 都匀市| 阜平县| 扎鲁特旗| 旺苍县| 浙江省| 枞阳县| 玉山县| 峡江县| 长寿区| 湖南省| 花垣县| 绍兴市| 焉耆| 新营市| 乌兰县| 治多县| 丰都县| 六枝特区| 长兴县| 肥乡县| 梧州市| 奉贤区| 江津市| 易门县| 巴里| 德庆县|