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進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒重復(fù)性差的解決辦法

來源:上海谷研實業(yè)有限公司   2018年05月22日 14:34  

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

   elisa試劑盒重復(fù)性差的緣由:

   1、樣品數(shù)量多少不一,加樣時間有長有短——重復(fù)某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。

   2、保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致——重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。

   elisa試劑盒重復(fù)性差解決方法:

   1、 重復(fù)某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。

   2、樣品加入后未混勻。解決方法:加樣后在混勻器上充分混勻。

   3、酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對。解決方法:TMB顯色用450/630波長。

   4、酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差。解決方法:校對酶標(biāo)儀。

   5、洗滌不正確。解決方法:洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應(yīng)板面向下,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機(jī)洗板時不應(yīng)有堵孔,洗滌應(yīng)充分。

   6、進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱)。解決方法:恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。

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進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

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