為什么有些原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)無(wú)法重復(fù)?
為什么有的細(xì)胞在相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間里,都養(yǎng)不到好的狀態(tài)?
為什么實(shí)驗(yàn)室中,超過(guò)一株以上的細(xì)胞都時(shí)好時(shí)壞?
細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、細(xì)胞變形、碎片增加、懸浮細(xì)胞容易成團(tuán)、培養(yǎng)基提前變色、鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點(diǎn)……
如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、細(xì)菌污染等原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示——你的細(xì)胞可能被支原體污染了!
支原體污染普遍存在
據(jù)美國(guó)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),細(xì)胞發(fā)生支原體污染的幾率在 70% 以上。同時(shí),由于支原體直徑很小,僅在 180nm~350nm 之間,只有通過(guò)電鏡才能看到,不易被實(shí)驗(yàn)者肉眼發(fā)覺(jué),支原體污染逐漸成為一個(gè)普遍存在的問(wèn)題。
支原體污染的危害
支原體污染是個(gè)循序的過(guò)程,普通抗生素對(duì)其無(wú)效。因此,支原體污染有多煩人,相信實(shí)驗(yàn)人都領(lǐng)教過(guò)了。
1、細(xì)胞狀態(tài)不佳,生長(zhǎng)速度慢,實(shí)驗(yàn)無(wú)法推進(jìn)。
2、細(xì)胞內(nèi) DNA、RNA 及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,時(shí)間、經(jīng)費(fèi)的浪費(fèi)。
3、一株污染的原代細(xì)胞成為實(shí)驗(yàn)室的污染源,對(duì)工作區(qū)域以及培養(yǎng)箱和液氮罐造成污染,進(jìn)而污染其他細(xì)胞,導(dǎo)致其他細(xì)胞繼發(fā)性污染,實(shí)驗(yàn)受影響,數(shù)據(jù)無(wú)法重復(fù),預(yù)期結(jié)果出不來(lái)。
5 x 10^5 cells/vial 人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 HREC
5 x 10^5 cells/vial 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 HRPEpiC
5 x 10^5 cells/vial 人晶狀體上皮細(xì)胞 HLEpiC
5 x 10^5 cells/vial 人虹膜色素上皮細(xì)胞 HIPEpiC
5 x 10^5 cells/vial 人結(jié)膜成纖維細(xì)胞 HConF
5 x 10^5 cells/vial 人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞 HNPCEpiC
5 x 10^5 cells/vial 人小梁網(wǎng)細(xì)胞 HTMC
5 x 10^5 cells/vial 人眼球脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞 HOCF
5 x 10^5 cells/vial 人結(jié)膜上皮細(xì)胞 HConEC
1 x 10^6 cells/vial 人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 HVCEC
5 x 10^5 cells/vial 人羊膜上皮細(xì)胞 HAmEpiC
1 x 10^6 cells/vial 人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 HVT
5 x 10^5 cells/vial 人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 HVMF
原代細(xì)胞
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