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大賽璐多糖涂敷型正相手性柱使用注意事項(xiàng)

來源:杭州亞萊博儀器有限公司   2018年06月08日 22:31  

多糖涂敷型正相手性柱使用注意事項(xiàng)


  本注意事項(xiàng)適用于如下型號的大賽璐手性色譜柱:


  CHIRALPAK AD-3/AD-H/AD  

  CHIRALCEL OD-3/OD-H/OD  

  CHIRALCEL OB-H/OB

  CHIRALPAK AS-3/AS-H/AS  

  CHIRALCEL  OJ-3/OJ-H/OJ  

  CHIRALCELN OC

  CHIRALPAK AY-3/AY-H  

  CHIRALCEL 0Z-3/OZ-H  

  CHIRALCEL OK

  CHIRALPAK AZ-3/AZ-H (*1)  

  CHIRALCELE OX- 3/OX-H  

  CHIRALCEL OG/OF/OA
  *1 CHIRALPAK的O AZ-3/AZ-H不可接觸任何堿性添加劑,在流動(dòng)相及樣品溶解液中,都不可含有堿性添加劑。
  1.本文提到的手性柱均為涂敷型 ,所以很多溶劑(例如乙酸乙酯、二氯甲烷、三lvjia烷、四氫呋喃、甲苯、丙酮、DMF、DMSO和甲基叔丁基醚等等)都會(huì)對色譜填料造成不可逆的損傷。凡是說明書中沒有提到的溶劑流動(dòng)相,請不要使用。
  通常情況下,用正己烷,乙醇和異丙醇為流動(dòng)相;
  特殊情況下,可以用到甲醇和乙腈,但是需要充分過渡儀器和手性柱,同時(shí)嚴(yán)格控制流動(dòng)相的混合比
  例。各手性柱對甲醇乙腈的比例要求不同,請參閱各自的英文版說明書。
  2.正相手性柱不能使用水作為流動(dòng)相, 也不能用水溶解樣品。否則柱子也會(huì)受到損傷。
  3.大賽璐手性柱zui 大耐壓為30Mpa (300Bar)。為了延長手性柱的使用壽命,建議使用壓力如下:
  粒徑10um手性柱:建議8Mpa下使用
  粒徑5um手性柱:建議在10Mpa下使用
  粒徑3um手性柱:建議在15Mpa下使用


  4.  流動(dòng)相的成分、比例不同,則粘度不同,更換流動(dòng)相時(shí),需要相應(yīng)地調(diào)整流速,以防止柱壓過高。
  在使用前一定要*清洗儀器管路、正確選擇流動(dòng)相。
  1.使用前(在連接該手性柱進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,請按以下步驟操作):
  1.1確認(rèn)儀器各部件狀態(tài):
  校準(zhǔn)各泵的流速看是否準(zhǔn)確。
  1.2使用溶劑及配制:
  使用的有機(jī)溶劑(流動(dòng)相)均為色譜級。
  配制流動(dòng)相時(shí),請充分振蕩混合均勻,并且超聲排除氣泡。

  1.3 樣品的配制:
  樣品一般是溶解于流動(dòng)相中進(jìn)樣。個(gè)別情況下,也可以是正己烷和異丙醇(或乙醇)的等量混合溶劑中。如果使用非流動(dòng)相溶解樣品,需要特別注意會(huì)出現(xiàn)樣品結(jié)晶析出的可能,一般
  表現(xiàn)為柱壓升高,峰型不對稱等。
  -一般不能使用100%的甲醇或Z腈溶解樣品。其它不能用作流動(dòng)相的溶劑(例如之酸乙酯、
  二氯甲烷、三lvjia烷、四氫呋喃、甲苯、丙酮、DMF、DMSO和甲基叔丁基醚等等)同樣不能用于溶解樣品。若樣品為油狀物,請?jiān)谂錁忧按_認(rèn)樣品里沒有殘留對柱子有損傷性
  的有機(jī)溶劑,例如乙酸z酯、二氯甲烷、三lvjia烷四氫呋喃和甲基叔丁基醚等。
  樣品不能溶解在水中。
  1.4溶劑切換:
  請?jiān)谶B接色譜柱前,按下述要點(diǎn)*做好溶劑切換
  根據(jù)HPLC系統(tǒng)中不同的當(dāng)前流動(dòng)相,采用不同的沖洗方法清洗所有管路:包括所有溶劑入口、泵、進(jìn)樣管路與裝置和其他連接管路(用=通代替色譜柱連接流路沖洗色譜系統(tǒng))
  如果當(dāng)前流動(dòng)相是水相流動(dòng)相(如水乙腈、緩沖液/甲醇),要先用純水*沖洗(約60mL )
  以除去其中存在的有機(jī)溶劑或緩沖液,然后用100%的異丙醇或乙醇*沖洗(約60 mL)以置換掉純水。接下來,用流動(dòng)相(通常是正己烷,異丙醇和乙醇;約30mL )沖洗儀器的整個(gè)
  管路,以置換掉醇。zui后連接上手性柱。
  如果當(dāng)前系統(tǒng)是非水流動(dòng)相(如烷烴類,異丙醇或Z醇),則可以直接用流動(dòng)相(通常是正己
  烷,異丙醇和乙醇),沖洗儀器約30mL,然后可以接上柱子。
  如果當(dāng)前系統(tǒng)的流動(dòng)相中含有一些會(huì)破壞正相柱的溶劑,如2酸乙酯,二氯甲烷和四氫呋喃
  等等),則需要用100%的異丙醇或2醇(約60mL )沖洗儀器的所有管路,以置換掉對柱子有損傷性的溶劑;然后用實(shí)驗(yàn)所需的流動(dòng)相(通常是正己烷,異丙醇和乙醇;約30mL)過
  渡儀器。zui后連接上手性柱。
  剛接上手性柱時(shí),不要突然升高至zui大流速,建議先小流速?zèng)_洗柱子,再逐漸升高到實(shí)驗(yàn)所需的
  流速。
  注意:對于管路比較多的HPLC儀器,建議其余未用的流路也必須按照此步驟依次過渡,以
  免誤操作時(shí)讓其他溶劑進(jìn)入系統(tǒng),造成嚴(yán)重后果。
  若實(shí)驗(yàn)所需的流動(dòng)相不是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇,而是其它流動(dòng)相,請使用前仔細(xì)
  查看說明書或與我們確認(rèn)。不同的流動(dòng)相,過渡儀器的步驟不同。
  如果在連接手性柱至HPLC儀器之前,不嚴(yán)格按照本說明沖洗置換HPLC儀器系統(tǒng)的溶劑 ,
  色譜柱有可能在*次進(jìn)樣之前就被破壞,-般表現(xiàn)為柱壓偏高,柱效嚴(yán)重下降:樣品甚至沒有
  保留,不能被分離等等。
  2.  使用中:
  推薦使用保護(hù)柱。
  3.  使用后:
  實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,根據(jù)使用的流動(dòng)相體系,確認(rèn)是否需要采用溶劑過渡色譜柱,然后按照說明書的保存方法,將色譜柱密封保存。

 

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