手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
核抗原有三個組成部分：組蛋白、DNA、可溶性核抗原，后者因可溶于磷酸鹽緩沖液（或生理鹽水）中，故名可提取核抗原（extractable nuclear antigen，ENA）。從分子水平識別ENA多肽抗體是20世紀80年代抗核抗體研究的重大進展，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)這類抗體有十余種，抗ENA抗體為其總稱。
檢測ENA抗體過去多用瓊脂雙向擴散、對流免疫電泳，近年來也建立ELISA法?，F(xiàn)已從免疫擴散法發(fā)展到與分子生物學有關(guān)的免疫印跡技術(shù)（1BT），且國內(nèi)已有抗ENA多肽抗體譜檢測試劑盒出售。IBT與對流電泳和雙擴法相比，更敏感特異，且操作簡單快速，不需特殊設(shè)備，整個檢測時間一個半小時即可完成，能在各級醫(yī)院應(yīng)用，從而將風濕性疾病的診斷和鑒別診斷提高到分子水平。
1，ENA多肽抗體譜檢測原理 通過對抗原抽提及酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)的改進，將抗原中的蛋白質(zhì)分子按分子量大小分離后轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上，通過與抗體反應(yīng)，觀察與特異性抗體反應(yīng)的多肽的分子量和數(shù)量，不僅可以用來檢測自身抗體，還可用于抗原分子的組成及抗原表位的研究。試劑盒中已將具有7種不同抗原性的ENA，如Sm、ulRNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70和Rib等印跡在硝酸纖維素膜上，可通過IBT一次檢測這7種自身抗體。
2．試劑 試劑盒內(nèi)有濃縮洗滌液、酶標抗體、顯色劑A、顯色劑B、終止液、印跡薄膜。
3．操作步驟
（1）將濃縮洗滌液用蒸餾水按說明書進行稀釋，然后每槽各加lmL，同時每槽加待測血清lOpL，充分混勻，置37℃孵育30rain。
（2）取出反應(yīng)槽，棄去槽中液體，用吸水紙吸干，加入已預(yù)溫37％的洗滌液，搖動洗滌4次，每次每槽加lmL，洗1min。
（3）每槽加入洗滌液0．5mL，再加所提供的酶標抗體10uL，混勻后置37％孵育30rain。
（4）同上洗滌后，加入顯色劑A0．5mL+顯色劑B0．5mL，作用5～10min。
（5）待陽性帶顯色清晰，即加終止液0．5mL，2min后棄去液體，用自來水洗滌后取出薄膜，待干后即可判斷結(jié)果。
4．結(jié)果判斷 將薄膜上顯色帶與陽性標準帶對照即可判斷出陽性自身抗體。如：①顯色區(qū)帶是29kD、28kD、13．5kD為抗Sm抗體；②顯色區(qū)帶是73kD、32kD、17．5kD為
抗ulRNP抗體；③顯色區(qū)帶是52kD為抗SSA抗體；④顯色區(qū)帶是48kD、47kD、45kD為抗SSB抗體；⑤顯色區(qū)帶是86kD、70kD為抗Scl-70抗體；⑥顯色區(qū)帶是55kD為抗Jo-1抗體；⑦顯色區(qū)帶是38kD、16．5kD、15kD為抗Rib抗體。
5．注意事項 ①判斷結(jié)果時，應(yīng)將薄膜記號線與標準帶“0”線對齊；②不同批號的標
準帶不可混用。
6。臨床意義 抗Sm是SLE的標志抗體且與狼瘡性腎炎活動程度相關(guān)。抗ulRNP是MCTD的標志抗體，少見于SLE、PSS等；抗SS-A和抗SS-B是SS的標志抗體，少見于SLE、MCTD、PSS等；抗Scl-70是PSS的標志抗體；抗Jo—1是PM／DM的標志抗體；抗Rib是SLE的標志抗體，少見于PSS等。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心