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ATCC細(xì)胞周期測定的操作步驟

來源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2018年06月28日 15:52  

ATCC細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。單個(gè)細(xì)胞的周期測定可采用縮時(shí)攝影的方法,但它不能代表細(xì)胞群體的周期,故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期。測定細(xì)胞周期的方法很多,有同位素標(biāo)記法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法等.我們看下操作步驟有哪些?
1、細(xì)胞生長至指數(shù)期時(shí),向培養(yǎng)液中加入BrdU,使zui終濃度為10μg/ml。
2、44小時(shí)加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時(shí)后常規(guī)消化細(xì)胞至離心管中,注意培養(yǎng)上清的漂浮細(xì)胞也要收集到離心管中。
4、常規(guī)染色體制片(見第三部分:染色體技術(shù))。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、ATCC細(xì)胞鏡檢100個(gè)分裂相,計(jì)*、二、三、四細(xì)胞期分裂指數(shù)。

Astragaloside III 黃芪皂苷III 黃芪皂甙III 84687-42-3 HPLC≥98% 10mg/支

Eugenol 丁香酚 97-53-0 HPLC≥98% 0.5ml/支

Cyclovirobuxine 黃楊堿 環(huán)維黃楊星D;環(huán)常綠黃楊堿D 860-79-7 滴定法≥99% 20mg/支

Salidroside 紅景天苷 紅景天甙 10338-51-9 HPLC≥98% 20mg/支

Rosarin 絡(luò)塞琳 84954-93-8 HPLC≥98% 20mg/支

Rosavin 絡(luò)塞維 84954-92-7 HPLC≥98% 20mg/支

Rosin 絡(luò)緦 85026-55-7 HPLC≥98% 20mg/支

Rosiridin 絡(luò)塞定 100462-37-1 HPLC≥98% 20mg/支

Sophocarpine 槐果堿 145572-44-7 HPLC≥98% 20mg/支
ATCC細(xì)胞

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