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液質(zhì)聯(lián)用儀的驗收要求(AB三重四極桿)

來源:東莞市譜標(biāo)實驗器材科技有限公司   2018年06月28日 18:06  

靈敏度,必須在單位質(zhì)量分辨率下

靈敏度是用信噪比來表示的,S/N,信噪比的計算又有峰-峰比和RMS之分(RMS計算的信噪比一般要比峰-峰比計算的高5~10倍)

 RMS是在待測峰周圍,找一段質(zhì)量范圍,然后做均方根平均,作為噪音高度(強度)。再拿待測峰的高度除以平均高度,即為RMS。

峰比,是尋找待測峰周圍一個高的噪音峰,拿待測峰的高度去比上強的那個噪音峰??赡芩幬餁埩魴z測時要求如何判定時會用到。儀器驗收時,不會做這事,因為即使做,也是一針好一針壞,每個實驗室的結(jié)果都不一樣。

質(zhì)譜的一大特色,就是它是一個質(zhì)量檢測器,峰面積跟質(zhì)量成正比。也就是說,拿1 pg/uL,進(jìn)樣10 uL;跟拿5 pg/uL,進(jìn)樣2 uL相比,如果其它條件都一樣,峰面積應(yīng)該是一樣的。

從實驗人員來說,稀釋樣品可能比較容易,很容易比較準(zhǔn)確;而進(jìn)樣器的定量環(huán)一般為20 uL,所以進(jìn)樣10 uL,一定比進(jìn)樣2 uL來得準(zhǔn)確一些。

分辨率,必須指明在哪個具體的質(zhì)量處

1)對于磁質(zhì)譜,我們?nèi)绻f分辨率為10000,比常規(guī)有機質(zhì)譜10000的分辨率,要好很多很多。

2)對于四極桿、離子阱,分辨率用10000表示是不科學(xué)的,因為它總在變,所以用FWHM或R=nM表示比較好,因為它在基本m/z范圍內(nèi)是不變的?;蛘撸f明是在哪個質(zhì)量數(shù)下測定的,比如在500 m/z時,分辨率優(yōu)于5000。

3)對于TOF/FT/Orbitrap等,必須指明在哪個質(zhì)量數(shù)下面測定的,也用10000、20000 之類的數(shù)字來表示。 

單位質(zhì)量分辨下的m/z范圍

必須是單位質(zhì)量分辨以內(nèi)的m/z范圍

1、四極桿型

 極限大約在3000~4000 amu

 那么,四極桿擅長的就是定量!

 2、離子阱型

 極限大約在4000(單位質(zhì)量分辨下),

離子阱普遍對小質(zhì)量有歧視(1/3效應(yīng)),但對大質(zhì)量(比如1000 amu以上的)反而比四極桿的響應(yīng)好。

 3,飛行時間TOF

單獨的TOF做個十幾萬沒什么問題,但在串聯(lián)了前端的四極桿、離子阱后,二級質(zhì)譜(MS/MS)的m/z范圍就會受到四極桿、離子阱的限制。

單從液質(zhì)聯(lián)用來說,能做串聯(lián)質(zhì)譜是非常重要的,因為液質(zhì)的背景干擾比氣質(zhì)大得多,串聯(lián)質(zhì)譜就是要去除背景。作為前端的質(zhì)量選擇器,大部分都采用四極桿或者離子阱。

談掃描速度

首先必須聲明,掃描速度不是非常重要的一個指標(biāo)。因為實際獲得一種譜圖,我們考慮的是duty cycle的時間,也就是采集一張譜圖需要多少時間。所以,考察儀器“快”、“慢” 的主要衡量標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)該是duty cycle時間,而不是掃描速度。

掃描速度指的是:把規(guī)定m/z范圍內(nèi)的離子一個一個“掃描”出質(zhì)量分析器的能力,表示為:amu/sec。這僅僅指從分析器出來的一段時間,質(zhì)量分析器不同、工作模式不同,差別就很大。

1、四極桿:

duty cycle時間=掃描時間+掃描之間的間隔時間

對于全掃描,比如 掃描m/z 50~550 amu,掃描速度1000 amu/sec,可知道掃描時間為:500/1000=0.5秒=500 毫秒,間隔時間為幾個毫秒,所以,大約每秒可以采集2張全掃描譜圖。

對于SIM,比如掃描 m/z 499.5~500.5 amu,掃描速度1000 amu/sec,可知道掃描時間為:1/1000=0.001秒。間隔時間就比較重要了,為幾個毫秒,所以,用SIM,每秒可采集幾百張譜圖

 2、TOF

 TOF是快速的質(zhì)量分析器,如果只求快,不要求分辨率,可以快到每秒采集幾萬張全掃描譜圖。

 如果還要求高分辨率,可以每秒采集1~20張全掃描譜圖。

 

 

  

  

  

 

 

 

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