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葉綠素(Chlorophyll)檢測(cè)試劑盒(比色法)

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2018年07月09日 16:05  

 

葉綠素(Chlorophyll)檢測(cè)試劑盒(比色法)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

    葉綠體(Chloroplast)是光合作用的細(xì)胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作。葉綠體中所含的色素主要有兩大類,葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合,成為色素蛋白復(fù)合體,其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)。

葉綠素(Chlorophyll)檢測(cè)試劑盒(比色法)檢測(cè)原理是葉綠素不溶解于水,而溶于有機(jī)溶劑,以有機(jī)溶劑粗提葉綠素,根據(jù)朗伯-比爾定律,某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質(zhì)濃度(C)和液層厚度(L)成正比,即A=αCL,其中α為比例常數(shù),當(dāng)溶液濃度以百分比濃度為單位,層液厚度為1cm 時(shí),α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。在本試劑盒情況下,葉綠素a和葉綠素b在 665nm、649nm處有大吸收波,根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可計(jì)算出葉綠素 a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素的提取以及定量檢測(cè)葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成:

   產(chǎn)品組成

   規(guī)格

Storage

試劑(A): Chlorophyll Assay buffer

   500ml

RT

試劑(B): 提取粉劑

3g

RT

使用說明書

          1份

自備材料:

1、研缽或勻漿器

2、離心管

3、濾紙或紗布

4、比色杯

5、分光光度計(jì)
操作步驟(僅供參考):

1、葉綠素提取:

①取菠菜或其他植物新鮮葉片,洗凈,擦干,去中脈,稱取剪碎的新鮮樣品 0.1g,置于研缽或勻漿器,加入少量提取粉劑(約 50mg)和 1mlChlorophyll Assay buffer,研磨或勻漿成液態(tài)。

②將研磨液或勻漿液轉(zhuǎn)移至 10ml 離心管,用少量葉綠素提取液沖洗研缽或勻漿器數(shù)次,后連殘?jiān)煌谷?10ml 離心管,補(bǔ)加 Chlorophyll Assay buffer 至 10ml,混勻,避光放置 5min-2h。

③觀察底部組織殘?jiān)咏诎咨?,即為提?,如果仍有較多組織顏色,應(yīng)再加入Chlorophyll Assay buffer 繼續(xù)避光放置。

④濾紙或三層紗布過濾,留取濾液,即為葉綠素粗提液。

2、分光光度計(jì)測(cè)定:取葉綠素粗提液加入光徑為 1cm 的比色杯,以 Chlorophyll Assay buffer 調(diào)零,測(cè)定粗提液在 665nm、649nm 處吸光度(A665、A649)。

計(jì)算:

葉綠素 a 含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)

葉綠素 b 含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)

總?cè)~綠素含量(mg/g)=CT×V×N/(W×1000)

式中:Ca=13.95×A665-6.88×A649

Cb=24.95×A649-7.32×A665

CT=6.63×A665-18.07×A649

V=葉綠素粗提液體積(ml)=10(ml)

N=稀釋倍數(shù)

W=樣品鮮重或干重(g)

注意事項(xiàng):

1、 為了避免葉綠素見光分解,操作時(shí)應(yīng)盡量避光,研磨或勻漿時(shí)應(yīng)盡量縮短時(shí)間。

2、 測(cè)定吸光度值大于 1 時(shí),可適當(dāng)稀釋后再行測(cè)定。

3、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期:12個(gè)月有效。

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