液相色譜柱的類(lèi)型和使用方法
液相色譜柱根據(jù)功能分為HPLC和UHPLC、UPLC柱,根據(jù)內(nèi)徑大小又有常規(guī)分析柱,、窄徑柱和毛細(xì)管柱的類(lèi)型區(qū)別,其中應(yīng)用的液質(zhì)聯(lián)用儀就是用的窄徑柱。因?yàn)榉治鲱?lèi)的儀器主要致力于對(duì)樣品成分的判斷,就需要能夠分離少量樣品的內(nèi)徑較小的色譜柱。而內(nèi)徑孔大的色譜柱用于進(jìn)樣量大的成品純化和分離。
類(lèi)型特點(diǎn)決定使用范圍,雖然液相色譜柱已經(jīng)有了的發(fā)展和的技術(shù)含量,普通的HPLC柱仍然具有用武之地,這是要與相對(duì)應(yīng)的色譜柱匹配的,只有的合作才能實(shí)現(xiàn)二者******化的勢(shì)。
不同色譜柱填充物不同,作用和使用范圍也不盡相同,總體來(lái)說(shuō)填充物的粒徑變小讓色譜柱的分離性能發(fā)揮出來(lái)。但也不能一味追求小粒徑,小粒徑不代表樣品通過(guò)色譜柱的行徑窄小,也不代表就能將色譜儀的效用發(fā)揮******,一切都是需要相互匹配。
類(lèi)型不同的色譜柱使用方法是*一樣的,使用前確定好流動(dòng)相,對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者不便處理的就要使用保護(hù)柱,雖然會(huì)在一些程度上影響***后的效果,但是保護(hù)柱帶來(lái)的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于允許出現(xiàn)誤差的范圍。
使用結(jié)束一定要注意色譜柱的清洗保存,用緩沖溶液進(jìn)行在線(xiàn)沖洗,注意柱中填充物的穩(wěn)定性。沖洗結(jié)束*浸泡在合適的溶劑里,防止它受到空氣、水的污染。理論上,合理規(guī)范保存的色譜柱能夠使用兩年之久。
如果發(fā)現(xiàn)色譜柱的效果大不如前,就試一下看是否因?yàn)閮?nèi)部污染造成。嘗試進(jìn)行在線(xiàn)稀硝酸沖洗,或者將其中的零部件拆下進(jìn)行分別清洗。也可以試著將里面的填充物取下?lián)Q上的。如果這些辦法都不可行,就只有一個(gè)方法——更換的色譜柱。
液相色譜柱根據(jù)功能分為HPLC和UHPLC、UPLC柱,根據(jù)內(nèi)徑大小又有常規(guī)分析柱,、窄徑柱和毛細(xì)管柱的類(lèi)型區(qū)別,其中應(yīng)用的液質(zhì)聯(lián)用儀就是用的窄徑柱。因?yàn)榉治鲱?lèi)的儀器主要致力于對(duì)樣品成分的判斷,就需要能夠分離少量樣品的內(nèi)徑較小的色譜柱。而內(nèi)徑孔大的色譜柱用于進(jìn)樣量大的成品純化和分離。
類(lèi)型特點(diǎn)決定使用范圍,雖然液相色譜柱已經(jīng)有了的發(fā)展和的技術(shù)含量,普通的HPLC柱仍然具有用武之地,這是要與相對(duì)應(yīng)的色譜柱匹配的,只有的合作才能實(shí)現(xiàn)二者******化的勢(shì)。
不同色譜柱填充物不同,作用和使用范圍也不盡相同,總體來(lái)說(shuō)填充物的粒徑變小讓色譜柱的分離性能發(fā)揮出來(lái)。但也不能一味追求小粒徑,小粒徑不代表樣品通過(guò)色譜柱的行徑窄小,也不代表就能將色譜儀的效用發(fā)揮******,一切都是需要相互匹配。
類(lèi)型不同的色譜柱使用方法是*一樣的,使用前確定好流動(dòng)相,對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者不便處理的就要使用保護(hù)柱,雖然會(huì)在一些程度上影響***后的效果,但是保護(hù)柱帶來(lái)的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于允許出現(xiàn)誤差的范圍。
使用結(jié)束一定要注意色譜柱的清洗保存,用緩沖溶液進(jìn)行在線(xiàn)沖洗,注意柱中填充物的穩(wěn)定性。沖洗結(jié)束*浸泡在合適的溶劑里,防止它受到空氣、水的污染。理論上,合理規(guī)范保存的色譜柱能夠使用兩年之久。
如果發(fā)現(xiàn)色譜柱的效果大不如前,就試一下看是否因?yàn)閮?nèi)部污染造成。嘗試進(jìn)行在線(xiàn)稀硝酸沖洗,或者將其中的零部件拆下進(jìn)行分別清洗。也可以試著將里面的填充物取下?lián)Q上的。如果這些辦法都不可行,就只有一個(gè)方法——更換的色譜柱。
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