轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的路上,有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼淚,聽小納君說幾句,希望下面這幾點(diǎn)建議可以幫助你在細(xì)胞培養(yǎng)的路上,少一點(diǎn)污染,多一點(diǎn)快樂!
細(xì)胞方面
1. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。
2. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長的慢,可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
3. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。
4. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長狀況。記住,是每天。
phospho-Tau protein (Thr489) 表皮生長因子抗體(小鼠)
Phospho-TBK1/NAK (Ser172) 表皮生長因子抗體(人)
Phospho-TCTP(Ser46) 表皮生長因子抗體(大鼠)
Phospho-Tie2 (Ser1119) 表皮膜蛋白1抗體
Phospho-Tie2 (Tyr992) 臂板蛋白4C抗體
Phospho-TIF1beta(Ser824) 臂板蛋白3F抗體
Phospho-TLK1(Ser695) 臂板蛋白3A抗體
Phospho-TNK1 (Tyr277) 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 鼻咽癌癌基因抗體
Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體
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