大鼠elisa檢測試劑盒采用RT-PCR擴增出大小409bp豬繁殖與呼吸綜合征病毒核衣殼蛋白基因（PRRSV N gene）,將該基因克隆到表達載體pGEX-KG,構(gòu)建重組表達載體pGEX-KG-N,轉(zhuǎn)化表達菌株BL21（DM3）誘導(dǎo)表達,經(jīng)SDS-PAGE和Western blot分析表明,重組N蛋白獲得了表達,融合蛋白相對分子質(zhì)量為41 000,并具有良好的免疫學(xué)活性。ELISA試劑盒置4℃前提保留12個月,試劑盒不亂性無顯著改變。
研制的ELISA試劑盒為PRRSV臨床血清抗體檢測及流行病學(xué)調(diào)查提供了技術(shù)手段。該試劑盒對350份臨床疑似血清檢出率為88.6%。擴大誘導(dǎo)培養(yǎng),收集菌體,提取包涵體,用GST-Protein Purtification Kit親和層析純化目的蛋白,SDS-PAGE電泳檢測純度達到90%以上,可知足診斷抗原質(zhì)量要求。ELISA試劑盒批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為3.44%～6.34%和5.04%～7.64%。優(yōu)化后抗原zui適包被質(zhì)量濃度為2.5mg/L;血清zui適稀釋度為1∶100;對血清樣本檢測臨界值為0.224;特異性為95%,敏感性為90%;與豬細小病毒、豬偽狂犬病病毒、豬乙型腦炎病毒、豬圓環(huán)病毒、豬瘟病毒等常見豬繁殖障礙病尺度陽性血清無交叉反應(yīng)。大鼠elisa檢測試劑盒用純化PRRSV重組核衣殼蛋白GST-N為包被抗原,建立檢測PRRSV血清的間接ELISA診斷方法,并組裝ELISA試劑盒。

 Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體

 Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體

 Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) 胞漿型磷脂酶A2抗體

 Phospho-Troponin I (Ser23/24) 胞漿蘋果酸酶1抗體

 Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) 胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體

 Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387) 胞漿-5´-核苷酸酶-Ⅱ抗體

 Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) 包含氧化還原酶的WW域抗體
大鼠elisa檢測試劑盒