小鼠elisa檢測試劑盒試驗操作者們能夠隨口說出。談到ELISA的長處,也正是因而,使得ELISA試劑盒在試驗室中得到廣泛的應(yīng)用范圍??墒?,試驗成果的影響遭到多方面因素。而試劑盒產(chǎn)品的挑選也很重要,乃至*表現(xiàn)不出ELISA試驗的含義與長處。那么怎么運用ELISA試劑盒可將長處放到zui大呢?
1.洗刷參數(shù)
洗刷量:主動洗板機會分配洗刷液。如果您之前遭受過高布景,那么不要猶豫,將洗刷量調(diào)為高,是比包被體積更高。太少的洗刷液會讓一部分剖析外表洗刷不到,然后明顯增加布景。一切反響孔的洗刷量有必要相同。ELISA板的商一般會在試劑盒的運用手冊中列出包被量。職業(yè)中一般運用的包被量是200 μl。
如果您你的試劑盒也是這樣,那么商可能會主張運用300 μl洗刷液進行洗刷,以便清潔整個反響孔的壁。一般來說,洗刷量越高,則孵育過程殘留的抗體或抗原量就越少。
2. 清洗液
一般選用0.01Mol/L pH 7.2 PBS吐溫緩沖液。吐溫是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,為非離子型的外表張力物質(zhì),常做助溶劑。吐溫的編號依聚合山梨醇所結(jié)合的脂肪酸品種不同而定。吐溫20是結(jié)合月桂酸、吐溫40是結(jié)合棕櫚酸、吐溫60是結(jié)合硬脂酸,吐溫80是結(jié)合油酸等。一般用吐溫20參加緩沖液內(nèi)做為濕潤劑,以削減非特異性吸附。也可在PBS緩沖液中參加1%牛血清白蛋白(或10%小牛血清或卵清蛋白),特別在抗原包被今后,以牛血清白蛋白緩沖液再包被一次,而占有孔內(nèi)剩余方位,這樣來削減非特異性反響。
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