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組化筆又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術(shù)。它把免疫反應的特異性、 組織化學的可見性巧妙地結(jié)合起來，借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、 電子顯微鏡)的顯像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原 物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。
自制組化筆在免疫組化染色中的應用戴曉淳，組化筆在免疫組化染色中，為防止抗體外溢和被稀釋，必須擦掉切片組織周邊的液體，耗時費力。采用Ｓ—Ｐ法免疫組化染色的切片經(jīng)二甲苯脫蠟、純酒精脫苯后，用自制組化筆在切片組織周圍畫一圓圈，再逐級水化，以后染色步驟按試劑盒說明進行。目前，國外生產(chǎn)的組化筆，價格貴，國內(nèi)尚未生產(chǎn)。用自制的組化筆經(jīng)標記后，每步只需甩掉液體后直接滴加抗體進行染色，此時滴加的抗體被限定在組化筆所劃好的范圍內(nèi)，無外流現(xiàn)象。本法每張切片平均滴加抗體２０～３０ｍｌ，明顯節(jié)省了抗體，染色結(jié)果與擦片法比較也無明顯差別，此油性圈在組化染色完成后，經(jīng)酒精逐級脫水、二甲苯透明后即可去除。將液體灌入廢棄的ＭＡＲＫＥＲ筆或水彩筆，即成組化筆。
細胞通透、封閉內(nèi)源性過氧化物酶，用封閉通透液浸潤切片30min（RT 避光）配法是用預熱 40 ml PBS 加 120ul TritonX-100 加熱幾分鐘后，臨用前加 400 ul 30％H 2 O 2 。PBS 溶液洗 3 次×3 min?？乖迯捅┞犊乖瓫Q定族 10) 切片放入 0.01 M 檸檬酸鈉緩沖溶液（pH6.0）后，在微波爐里高火4min至沸騰后，再加熱約 6 min×4 次， 每次間隔補足液體， 防止干片。封閉非特異性蛋白 11) PBS 溶液洗 3 次×3 min； 12) 將切片取出,周圍水分用濾紙吸干,用組化筆在組織周圍畫上圈, 在圓圈內(nèi)組織滴入 5%羊血清（與二抗來源一致）后放入濕盒中，室溫30（10～30）min。一抗孵育 13) 甩去切片上的羊血清,用濾紙擦干組織周圍殘留血清，直接加入 已稀釋的一抗（1：250、500、1000）后，放入濕盒中室溫 1 小時，然后4度過夜，從冰箱中取出需 37 ℃復溫 45 min。二抗孵育。將一抗倒掉并用 PBS 洗 5 min×5 次。用濾紙將圓圈周圍的水吸去，加入已稀釋的二抗后放入37 ℃恒溫烤箱中30min（回收）。
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