如何選擇正確的elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)方法
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒基因翻譯蛋白質(zhì), PCR可以檢測(cè)基因的表達(dá)量,定量和相對(duì)定量。但基因翻譯表達(dá)蛋白質(zhì)是個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,有可能出現(xiàn)基因量大而蛋白質(zhì)少,或者相反,甚至其他情況。所以,PCR是從基因?qū)用鍰NA或mRNA進(jìn)行的檢測(cè), 而Western Blot是目前一種結(jié)合內(nèi)參對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行半定量的方法,Elisa可以定量檢測(cè)某些蛋白、激素等
一、目的
雖然兩者都是通過(guò)抗原抗體反應(yīng)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè),WB主要還是定性,Elisa可以定性,也可以定量。
WB所檢測(cè)的一般是抗原,而Elisa抗原抗體都可以檢測(cè)。
WB所檢測(cè)的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚體、降解產(chǎn)物等,一句話,WB可以確定所用抗體是與那種蛋白起作用的;而Elisa無(wú)能為力,一鍋端了。
二、模式
WB是(抗原-抗體-二抗酶)模式進(jìn)行檢測(cè);Elisa模式有多種,如(抗原-抗體-二抗酶)、(抗原-抗體-抗原酶)、(抗抗體-抗體-抗原酶)、(抗體-抗原-抗體酶)、(抗抗體-抗體-抗原-抗體酶)等等很多很多。
三、抗體的適用性
WB所適用的一抗一般是線性位點(diǎn)的,ELISA線性或構(gòu)象型抗體都可以使用。從另一個(gè)意義上講,WB可以做抗體是線性位點(diǎn)還是構(gòu)象型位點(diǎn)的補(bǔ)充判定,而Elisa不行。
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