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小鼠elisa試劑盒免疫酶技術(shù)有哪些優(yōu)勢(shì)

來(lái)源:上海一研生物科技有限公司   2018年11月08日 13:17  

     小鼠elisa試劑盒免疫熒光技術(shù)雖已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)的研究與診斷,但是熒光抗體染色標(biāo)本不能長(zhǎng)期保存,對(duì)組織細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)分辨不清,免疫酶技術(shù)則能克服上述不足,標(biāo)記免疫 酶技術(shù)的敏感性更優(yōu)于免疫熒光法,對(duì)石蠟切片標(biāo)本尤為適用,為免疫病理研究開(kāi)辟了一條新途徑,酶顯色產(chǎn)物具有較高的電子密度,經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理還可以進(jìn)行免疫 電鏡觀察,免疫酶組化技術(shù)分為酶標(biāo)記法與非標(biāo)記抗體技術(shù),前者是將酶通過(guò)交聯(lián)劑結(jié)合在抗體分子上,形成酶標(biāo)記抗體。后者是將酶作為抗原與相應(yīng)的特異性抗體 連接進(jìn)行的免疫反應(yīng),稱為非標(biāo)記抗體酶技術(shù)。

     免疫酶技術(shù)的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。可作固相載體的物質(zhì)很多,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有 較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來(lái)的免疫活性。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式,在測(cè)定過(guò)程中,它作為載體和容器,不參與化學(xué) 反應(yīng),加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。

     聚苯乙烯載體的形狀主要有三種:小試管、小珠和微量反應(yīng)板。小試管的特點(diǎn)是還能兼作反應(yīng)的容器,后放 入分光光度計(jì)中比色。小珠一般為直徑0.6cm的圓球,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。如用特殊的洗滌器,在洗滌過(guò)程中使圓珠滾動(dòng)淋洗,效果更好。常 用的載體為微量反應(yīng)板,于ELISA測(cè)定的產(chǎn)品也稱為ELISA板,通用的標(biāo)準(zhǔn)板形是8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè),有制成8聯(lián)或 l2聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA板的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè),并可在特定的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果?,F(xiàn)在已有 多種自動(dòng)化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測(cè),包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利。

     良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性 能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此 每一批號(hào)的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內(nèi)加入適當(dāng) 稀釋的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后分別測(cè)每孔溶液的吸光度??刂品磻?yīng)條件,使各讀數(shù)在0.8左右。計(jì)算所有讀數(shù)的平均值。 所有單個(gè)讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應(yīng)小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特點(diǎn)為質(zhì)軟板薄,可切割,價(jià)廉、但光潔 度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有時(shí)也略高。

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