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間接法中如何提高進(jìn)口elisa試劑盒陽(yáng)性值
近日有客戶進(jìn)口elisa試劑盒間接法中，如何提高陽(yáng)性值，在抗原濃度不變的情況下？他用自己的抗原包被的板子，用自己的酶標(biāo)二抗和顯色液做，陽(yáng)性值很低，為OD 0.5。但是試劑盒中的酶標(biāo)二抗和顯色液做，陽(yáng)性值卻很高OD 1.4，這樣看來(lái)我的抗原應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題，好像問(wèn)題出在酶標(biāo)二抗上，請(qǐng)勁馬技術(shù)幫忙分析。根據(jù)客戶留言在網(wǎng)上問(wèn)題解答如下：
先要確定兩種酶標(biāo)二抗使用的是不是同一批包被的板，因?yàn)殡m然是相同的抗原，可能兩次包被不一樣。
如果是同一批板，出現(xiàn)這種情況只能說(shuō)明你的酶標(biāo)二抗失活了，買(mǎi)新的二抗，按說(shuō)明書(shū)上的稀釋倍數(shù)稀釋；陰性對(duì)照有顏色很可能是沒(méi)封閉好。陽(yáng)性值是由你的抗原抗體間親和力決定的，增加抗原抗體用量，或提高二抗?jié)舛?，但靈敏度可能會(huì)降低，你可以重新摸下工作濃度；
陰性值降低，你可以采用BSA封閉2小時(shí)看看，好像沒(méi)聽(tīng)說(shuō)有人用FCS封閉的，你可以嘗試采用其他的封閉液，據(jù)我了解，用BSA封閉不是很好，可以試試脫脂奶粉；再就是TMB本身時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)略顯色，你可以調(diào)整顯色時(shí)間。
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