貼壁細胞標準換液步驟
一、準備工作
1. 廢液缸
2. 吸管
3. 新鮮培養(yǎng)基
4. 油性記號筆/普通簽字筆
5. 實驗記錄本
二、實驗步驟
1. 打開層流,打開層流間和超凈臺的紫外線燈,廢液缸和吸管同時照射;
2. 把水浴鍋調整到37℃ 并使其穩(wěn)定;
3. 將新鮮培養(yǎng)基放置到水浴鍋中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液體保持10分鐘,(200ml液體保持15分鐘,500ml液體保持20分鐘),間或搖動;
4. 著無菌服裝,帽子,口罩和手套
5. 用75%乙醇消毒培養(yǎng)基瓶外壁,放置到超凈臺上;
6. 將細胞培養(yǎng)瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
7. 用吸管吸棄舊培養(yǎng)基,更換吸管,于非細胞培養(yǎng)面加入新鮮培養(yǎng)基;
8. 記錄實驗過程和細胞培養(yǎng)瓶號。
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