高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀作為一個常用的儀器，其基本功能不外乎一個比色測定，與比色計(jì)所不同的是在測定波長范圍、吸光度范圍、光學(xué)系統(tǒng)、檢測速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測定軟件功能等方面的差異，當(dāng)然全自動酶免疫分析系統(tǒng)還具有自動洗板、溫育、加樣等功能。我們在選購高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀時應(yīng)該考慮儀器的濾光系統(tǒng)和測定波長參數(shù)：
　　一、濾光系統(tǒng)
　　高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀簡單的是用濾光方式來劃分。一般來說，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。也有一些高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測，本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
　　光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便，可以進(jìn)行光譜掃描，靈活性等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)然，濾光片系統(tǒng)也有其顯著的優(yōu)勢，例如價格較為便宜，檢測靈敏度高，帶寬的可選擇性，可以進(jìn)行快速的濾光片切換，可配備有自動加樣系統(tǒng)，在化學(xué)發(fā)光檢測中光線的透過率高。
　　目前，濾光片系統(tǒng)應(yīng)用更廣，因?yàn)樗梢宰寣?shí)驗(yàn)者完成更多的試驗(yàn)。
　　二、測定波長
　　一般高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀的測定波長在400～750nm或800nm之間，*可以滿足ELISA的顯色測定。目前國內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP)，底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)，其在過氧化氫溶液的存在下，經(jīng)HRP作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌。當(dāng)pH值為5．0左右時，DAB在450nm波長處有大吸收，當(dāng)pH值降為L0時，大吸收波長移至492nm，同時摩爾消光系數(shù)變大，顯色加深，因而常用強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)。TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長450nm處有大消光系數(shù)，如果HRP量少，H：O：和TMB過量時，則形成藍(lán)色的陽離子根。降低pH，即可使藍(lán)色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此，450nm和492nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。各種高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個波長，有的高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，其他濾光片可根據(jù)自己的需要選擇。有時，有的實(shí)驗(yàn)室希望用高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀作微量生化測定，故高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家對其生產(chǎn)的高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀擴(kuò)展了紫外檢測功能，此時需要一個340nm波長濾光片。此時，高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm。
　　高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀有單波長和雙波長檢測功能。有時使用者不知在什么情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色具大吸收的波長即450nm或492nm進(jìn)行比色測定；而“雙波長”則除了用對顯色具大吸收的波長即450nm或492nm進(jìn)行比色測定外，同時用對特異顯色不敏感的波長如630nm進(jìn)行測定，高通量型化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀后打印出來的吸光度則為二者之差。630nm波長下得到的吸光度是非特異的，來自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此，在ELISA比色測定中，好使用雙波長，且不必設(shè)空白孔。