優(yōu)缺比一比:
1. 蛋白負染色試劑盒
缺點:需搭配黑底容器以便觀察
優(yōu)點:
(1) 特殊原理:負染原理,染劑只染膠體,不結合蛋白
(2) 快速染色:染色過程只需 5 分鐘,不需要醋酸固定
(3) 高靈敏度:超高染色靈敏度 < 1 ng
(4) 實驗相容:染色過后可進行蛋白質轉漬或、電泳溶離、質譜儀蛋白質鑒定與轉譯后修飾分析。
(5) 安全可靠:染液不具毒性且可室溫儲存
(6) 方便觀察:肉眼可見影像,不須熒光
2. SYPRO Ruby
優(yōu)點:靈敏度高
缺點:
(1) 操作過程需要全程避光
(2) 須長時間過夜染色
(3) 操作過程需搭配有機溶劑
(4) 需搭配價格高昂之熒光掃描機會 CCD 影像擷取系統(tǒng)取得影像
3. 硝酸銀染色
優(yōu)點:
(1) 染色靈敏度高達 1ng。
(2) 肉眼可立即觀察染色結果。
缺點:
(1) 染色步驟復雜且耗時,新手較難駕馭,并且無法重新染色。
(2) 因銀離子難以去除,即使使用改良版的質譜儀兼容之硝酸銀染色法搭配后續(xù)質譜分析,依舊難以成功分析蛋白樣品。
4. CBR-250 (Coomassie Brilliant Blue R-250)
優(yōu)點:容易取得,價格較低。
缺點:
(1) 靈敏度不高,僅 50 ng。
(2) 操作時間長達 2 小時至隔夜。
(3) 操作過程需搭配有機溶劑,長期使用將對使用者造成健康風險。
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