點(diǎn)燃引起的慢性實(shí)驗(yàn)性癲癎模型

(1)復(fù)制方法  健康雄性大鼠，體重為250～300g。以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)(按50～60mg/kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后，固定在立體定位儀上。剪去頭頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。無(wú)菌條件下沿正中線將皮膚切開1cm，按大鼠立體定位圖譜標(biāo)好杏仁核立體坐標(biāo)位置(坐標(biāo)定位：AP2mm，ML2mm， DVR8.5mm)。用小型牙鉆鉆透骨面，將長(zhǎng)度為8.5mm的杏仁核刺激電極徐徐插入杏仁核。同時(shí)在顱骨正中線左右各旁開4mm，前后各10mm處安放4個(gè)皮質(zhì)電波記錄電極，插入深度為2mm，用牙托粉將電極固定。為防止電極脫落，可在枕骨和額骨安放2～3個(gè)小螺絲釘，并以牙托粉固定。術(shù)后肌肉注射卡那霉素(每只125mg/d)或慶大霉素(每只2萬(wàn) U/d)，連續(xù)3d，以防感染。1周后可用于實(shí)驗(yàn)。

每天在固定的時(shí)間給予大鼠電刺激一次，每次刺激3s。刺激強(qiáng)度從80μA開始，以后每日增加80μA，直至引起刺激部位的后放電，此時(shí)電流即為后放電電流。如果反復(fù)刺激始終不能誘發(fā)后放電的大鼠，終也不能形成點(diǎn)燃效應(yīng)。因此，需選擇測(cè)出后放電電流的大鼠用于實(shí)驗(yàn)。

(2)模型特點(diǎn)  點(diǎn)燃是通過在腦內(nèi)某特定局部反復(fù)亞抽搐劑量電刺激，終導(dǎo)致強(qiáng)烈的部分或全身性癲癎發(fā)作。邊緣系統(tǒng)是常用的電刺激部位。點(diǎn)燃一旦形成，可以維持很長(zhǎng)時(shí)間甚至終身。該模型具有以下特點(diǎn)：①即使不再給以電刺激，皮質(zhì)電波的規(guī)律性、發(fā)作癲癎樣放電可維持一年以上。②再次電刺激又可以引起陣攣性發(fā)作。③少數(shù)動(dòng)物可以自然發(fā)作。④發(fā)作是通過突觸間傳遞引起的。目前認(rèn)為點(diǎn)燃模型可能是由于反復(fù)電刺激引起內(nèi)源性谷氨酸釋放增多，并使NMDA——受體敏感化以及使其數(shù)目增加的結(jié)果。點(diǎn)燃效應(yīng)可在多種動(dòng)物形成，但常用大鼠。刺激部位以杏仁核敏感，其次是蒼白球、海馬和梨狀區(qū)。但紅核、黑質(zhì)、腦干的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等部位不敏感。電刺激的標(biāo)準(zhǔn)條件為電流波長(zhǎng)1ms、頻率60Hz、持續(xù)1ms。其中頻率為25、60、150Hz的點(diǎn)燃作用相同。刺激強(qiáng)度：以杏仁核為例，大鼠為50～400μA，貓為100～1000μA，猴和狒狒為200～600μA。

(3)比較醫(yī)學(xué)  點(diǎn)燃模型是目前*的一種更為接近人類、應(yīng)用廣泛的復(fù)雜部分性發(fā)作模型。據(jù)文獻(xiàn)資料，許多動(dòng)物可作為點(diǎn)燃模型，如青蛙、爬蟲類、小鼠、大鼠、兔子、狗、貓、恒河猴以及狒狒等。杏仁核以及其他邊緣系統(tǒng)的點(diǎn)燃模型的癇性發(fā)作通常經(jīng)歷五個(gè)階段：1級(jí)，面部陣攣；2級(jí)。面部陣攣伴節(jié)律點(diǎn)頭；3級(jí)。面部陣攣、點(diǎn)頭、單肢陣攣；4級(jí)，3級(jí)+后肢站立；5級(jí)，4級(jí)＋跌倒。4級(jí)和5級(jí)可作為繼發(fā)性全身性癲癎模型。點(diǎn)燃一旦建立，這種腦細(xì)胞及驚厥行為的敏感性可長(zhǎng)期維持及至動(dòng)物終身，這便于探討癲癎研究中的神經(jīng)元高度興奮形成機(jī)制以及高度興奮的保持和發(fā)展。同時(shí)該模型還有建立方便、成本較低的優(yōu)點(diǎn)，在篩選新的抗癲癎藥物及測(cè)試其副作用方面比正常動(dòng)物及其他一些模型更具敏感性和實(shí)用性。