上周五,客戶張老師聯(lián)系我司業(yè)務(wù)員,跟我司業(yè)務(wù)員反應(yīng)elisa試劑盒相關(guān)問題,張老師在提到實驗中發(fā)現(xiàn)幾個問題,希望我司技術(shù)能給出參考意見。
客戶張老師對于elisa試劑盒在實驗中所遇到的問題,關(guān)于張老師所提出的elisa試劑盒常見問題,我司陳技術(shù)根據(jù)長期Elisa經(jīng)驗這樣作出解答的:
張老師:
1、我看見有的夾心ELISA試劑盒中技術(shù)抗體和捕獲抗體為一種抗體,而不是分別針對待測抗原的不同表位的一對抗體。
我不理解的地方是:捕獲抗體把抗原上的表位都結(jié)合完了,技術(shù)抗體怎么能與抗原結(jié)合呢?
問題1:正常情況下,雙抗體夾心法中使用的包被抗體和酶標(biāo)記抗體肯定不是同一個抗體,如果是同一個的話,會有很強的競爭,應(yīng)該是無法做的。你是怎么知道別人試劑盒中使用的是同一個抗體的呢,這應(yīng)該是無法了解的呀。
2、在網(wǎng)上可以搜索到有關(guān)夾心ELISA技術(shù)TNF、CEA、IL-2、IL-8等說明書,我發(fā)現(xiàn)它們所用的稀釋液配方都不一樣,差別很大。
TNF-a的稀釋液:PBS 100ml;BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。
IL-6的稀釋液:洗滌液 100ml BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。
IL-8的稀釋液:洗滌液 100 ml;
PEG(聚乙二醇,MW6000) 3.0g。
我想知道是根據(jù)什么原則來選擇稀釋液的組成?有沒有可以通用的???謝謝!
問題2:稀釋液基本上是和所使用的原料有關(guān),不同的原料組成的技術(shù)相同物質(zhì)的試劑盒所使用的稀釋液就可能不同。
從你提供的數(shù)據(jù)看,IL-6的稀釋液應(yīng)該只比TNF-a多了個Tween-20而已,差別不是很大。至于選BSA還是PEG那就和原料有很大關(guān)系了。
Elisa試劑盒中有任何無法操作及解析的問題均可聯(lián)系我司,我們?yōu)槟峁I(yè)的售前,售后意見。
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