小鼠ELISA試劑盒操作要素對ELISA試劑盒的影響ELISA試劑盒測定過程：固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標(biāo)物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加停止液→比色→斷定成果。

ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應(yīng)留意以下5個(gè)方面。

1. 在成批手藝檢測中，還應(yīng)留意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)刻的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時(shí)刻不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不留意可能會(huì)導(dǎo)致過錯(cuò)成果或定量禁絕。

2. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議試驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵過程。意圖是除掉未結(jié)合的免疫反響物，停止抗原抗體反響，除掉標(biāo)本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機(jī)洗板或手藝洗板，前者洗刷質(zhì)量較好，各反響孔洗刷作用均一，批內(nèi)、批間差異小，手藝洗板應(yīng)留意操控各孔洗刷作用，差異不宜太大。

3. 跟著病況的發(fā)展或由其他要素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動(dòng)搖，因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。直接法測定中，標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。

4. 加樣一般運(yùn)用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加停止液。加標(biāo)本時(shí)有必要每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴，避免穿插污染。加酶結(jié)合物、底物和停止液時(shí)則不需更換吸嘴。