【產(chǎn)品簡介】

多標(biāo)記免疫熒光染色是基于抗原、抗體特異性結(jié)合的原理，選用辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗抗體，對試劑盒中的熒光染料進(jìn)行活化，將信號共價(jià)結(jié)合到抗原上。借助于不同的熒光染料標(biāo)記，通過多輪染色循環(huán)實(shí)現(xiàn)組織或細(xì)胞的原位多靶點(diǎn)染色。

【用途】

主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫熒光染色。

【背景介紹】

免疫組織化學(xué)染色及成像分析是研究組織形態(tài)和組織原位抗原表達(dá)*的檢測技術(shù)，廣泛應(yīng)用于臨床病理診斷和醫(yī)學(xué)及生物學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。組織切片樣本中蘊(yùn)含著豐富的信息，但是受制于傳統(tǒng)單標(biāo)記免疫組織化學(xué)染色方法的限制，通常只能對組織中的一到兩種抗原進(jìn)行染色分析，而且定量結(jié)果的判讀往往依賴于肉眼觀測，缺乏客觀標(biāo)準(zhǔn)。

愛必信的多標(biāo)記免疫熒光染色試劑盒是基于酪胺信號放大（TSA）技術(shù)開發(fā)得到，能夠在同一組織切片樣本上復(fù)染4-7種抗原并進(jìn)行區(qū)別標(biāo)記，擺脫了常規(guī)免疫組織化學(xué)染色和成像 技術(shù)的限制，這種新型免疫組織化學(xué)分析方案可以滿足組織微環(huán)境中復(fù)雜表型分析的需求。

【原理說明】

酪胺信號放大（tyramine signal amplification，TSA）技術(shù)已有20多年的歷史，其利用辣根過氧化酶（HRP）對靶抗原進(jìn)行高密度原位標(biāo)記，可大幅提高被檢測信號的靈敏度（圖1A,B）。

圖1. 酪胺信號放大（TSA）染色與傳統(tǒng)組織化學(xué)染色比較。A，Hela 細(xì)胞細(xì)胞色素 C 經(jīng)常規(guī)二抗標(biāo)記的免疫熒光染色的結(jié)果；B，相同濃度 下經(jīng) TSA 信號放大的結(jié)果；

錢幫國. 焦磊. 多標(biāo)記免疫熒光染色及多普成像技術(shù)在組織學(xué)研究中的應(yīng)用. 中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2017 (4): 373-382 

帶有染料標(biāo)記的底物酪胺（T）分子在過氧化氫氧化環(huán)境下，被抗體或探針固定的HRP轉(zhuǎn)化 為具有短暫活性的中間狀態(tài)（T*），然后被激活的中間態(tài)分子（T*）迅速與相接蛋白分子的富含電子區(qū)域（酪氨酸殘基）進(jìn)行穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合，未被標(biāo)記的酪胺分子將被洗脫，借此實(shí)現(xiàn)對抗原的特異性染色。由于相接的蛋白（包括HRP，抗體，目標(biāo)抗原）都含有大量的酪氨酸結(jié)合位點(diǎn)，所以目標(biāo)抗原處會富集大量標(biāo)記分子，使信號被有效放大（圖1C）。

【實(shí)驗(yàn)操作流程】

【產(chǎn)品推薦】

愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨)：

二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體；WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；細(xì)胞因子、信號通路調(diào)節(jié)劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒；動植物提取物，定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...

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