96孔PCR儀的均勻性是PCR儀的重要指標,也是實驗人員非常關(guān)心的問題。造成各個孔位的溫度不均勻的因素大致有以下幾個:
1、 制冷半導體片的不均勻
2、 控溫點的數(shù)量
3、 邊緣效應及減弱辦法
4、 散熱器的散熱均勻性
5、 模塊的材料及形狀
6、 升降溫速度
一、 制冷半導體片的不均勻
現(xiàn)在的PCR儀大都是用半導體制冷片來控制溫度的,其通電后一面熱另一面冷,反向電極則熱冷面反向。
半導體制冷片雖然是工業(yè)化生產(chǎn),都幾乎都是手工的生產(chǎn)的,因此每一片都有差別,大的生產(chǎn)商會根據(jù)用戶的需要進行配對,如一臺PCR儀要三片就三片配成大致相同的阻值。阻值一般是廠家寫在每片制冷片上的(自己用萬用表是量不準的,因為一通電其溫度就變化,阻值就會改變)
因此半導體片的質(zhì)量會影響PCR儀的均勻性。一般大的生產(chǎn)廠家出廠時問題不大,但使用一段時間后,半導體片的性能會下降,但下降程度并不一致,則溫度差別就表現(xiàn)出來了。
大的問題是維修。半導體片本身是不能維修的。一般PCR儀都是多片半導體,普通維修會只更換其中一片,這樣就會造成新的跑得快,舊的跑得慢,溫度差別就大了。如果每片半導體片下面都有各自的溫度傳感器,則可以補償一些,如果是像AB的低端型號2720,4片半導體片只有一個溫度傳感器,則問題大了。當然更換半導體片后的裝配也是技術(shù)性很強的活,不經(jīng)過嚴格的培訓是做不到家的。這也是為什么大廠一般不在現(xiàn)場維修,而是要返廠,并且是一次性更換一套半導體片,因此成本較高。東勝龍811也是一律返廠并成套更換的。
二、控溫點的數(shù)量
一方面半導體片本身有一定的差異,另一方面使用一段時間后性能會下降,但下降程度并不一致,還有就是邊緣的和中間的半導體片的反面散熱不一致(后面會講到),這些都會造成模塊溫度的不均勻。常用的解決辦法是在每片半導體片下面安放溫度傳感器,并有相應的控制電路獨立控制和校準(這樣做生產(chǎn)商的成本會上升)。如AB的9700就有三個傳感器及相應的電路,而低端的只有一個。
多傳感器還有一個好處是可以分別控制不同的溫度,產(chǎn)生溫度梯度。
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