研域生物：酶標抗體的質(zhì)量判定與保存

來源：研域（上海）化學試劑有限公司 2019年05月08日 08:49

1．酶活性和抗體效價測定

采用雙向免疫擴散法（稀釋抗體）和DAB-H2O2 顯色反響檢測結(jié)合物中抗體效價和免疫沉淀線中的酶促反響。

2．酶量和IgG量

酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4

IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94′0.62

其間，0.42為酶蛋白自身（0.3）及結(jié)合戊二醛后添加的OD值，0.94為抗體蛋白與醛化酶結(jié)合后，OD280 約添加6%，故乘以0.94。兔IgG的OD280 =1.0時為0.62.

過碘酸鈉符號法IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.3）′0.94′0.62

符號率= OD403 / OD280 =0.3-0.6，即一個抗體分子上結(jié)合1-2個HRP分子.符號率能夠大于0.6-0.9。OD403 / OD280 =0.4，約相當于E/P=1.0。

酶標抗體的保存
經(jīng)判定合格的酶標抗體，因為硫化物及疊氮化物等可與酶結(jié)合，使HRP失活，因而，不能用硫化物及疊氮化物作為防腐劑，可加入等量的60%甘油，小量分裝（0.5ml/支），置4℃~-30℃保存。

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