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大鼠環(huán)氧化酶2(COX-2)試劑盒樣本處理及組成

來源:生物試劑   2019年05月15日 17:25  

大鼠環(huán)氧化酶2COX-2試劑盒樣本處理及組成

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本大鼠環(huán)氧化酶2COX-2)的含量。

樣本處理及要求

1.  血清將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

試劑盒組成

 

 

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

8孔×12

8孔×6

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個(gè)

1個(gè)

1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:80、40、20、10、5、2.5 ng/mL

2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

 

 

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