大鼠ELISA檢測試劑盒操作說明及注意事項

大鼠ELISA檢測試劑盒性能：

    1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

    2.特異性：不與其它細胞因子反應。

    3.重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

大鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟：

    1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

    2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

    3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

    4.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

    5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

    6.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

    7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

    8.取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

    9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

大鼠ELISA檢測試劑盒注意事項：

    1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

    用完，板條應裝入密封袋中保存。

    2. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

    3. 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使排槍加樣。

    4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計3算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

    5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6. 底物請避光保存。

    7. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

    8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

    9. 本試劑不同批號組分不得混用。

    10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。