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HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株 含STR鑒定

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2019年06月10日 09:21  

上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

產(chǎn)品名稱:HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株 含STR鑒定
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi),細胞耐藥倍數(shù)8倍以上;
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時通知銷售人員,我們將盡快為您解決!

注:耐藥細胞培養(yǎng)操作流程和普通細胞培養(yǎng)方法基本一致,只是在培養(yǎng)中會加藥維持篩選壓力

  • HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株 含STR鑒定
  • 三、細胞生長條件:

 

細胞系特征

細胞株名稱:HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株

種屬:智人

組織來源:人白血病

生長特性:懸浮生長

微生物及支原體檢測:陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件:

 

 

 

*培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml Taxol

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,低速離心,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液(注意不要吸出細胞),換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 低速離心,棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中(補加*培養(yǎng)基至8到10ml)。如果沒有特別說明,收到細胞后的次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準(zhǔn)確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。

凍存方法:

  凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO

  儲存:液氮儲存

     

 

收到細胞后應(yīng)如何去正確的處理:

   您需要準(zhǔn)備好細胞所要用到的培養(yǎng)基和相關(guān)試劑,雖然所有的貼壁,半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多,但是不同的實驗室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在,也會導(dǎo)致對細胞處理不當(dāng),或者環(huán)境的不適應(yīng)而造成細胞的死亡。

       1.收到細胞,時間要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。

       2.當(dāng)通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有任何問題時,進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。

       3.如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,保證每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。

上海琛藝實業(yè)耐藥細胞株提供STR鑒定,上百株細胞等待您的選購,歡迎咨詢銷售陳靜。

 

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