常有ELISA實(shí)驗(yàn)人員反映在處理樣品時出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生,本公司技術(shù)員特針對相關(guān)常見問題做出總結(jié),下面我們就來看看今天的內(nèi)容:elisa試劑盒標(biāo)本處理的哪些問題?
ELISA試劑盒標(biāo)本采集、處理和保存方式
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一、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。
二、標(biāo)本溶血
由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。
三、標(biāo)本凝集不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>
四、標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響
抗凝劑、酶抑制劑及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。
五、標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
樣品的處理在ELISA檢測實(shí)驗(yàn)中是一項(xiàng)基本工作,也是影響實(shí)驗(yàn)的一大主要因素。做ELISA試劑盒樣品因素和操作因素之后,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性就容易的多了。我公司試劑盒提供全程指導(dǎo)服務(wù),為您的實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)到底!歡迎您我司業(yè)務(wù)員。
很多的科研朋友在收到elisa試劑盒后,并不清楚該如何的去保存,其實(shí)保存與試驗(yàn)之間是息息相關(guān)的,所以這方面可要注意啦。
試劑盒保存方法:
1、不同批號的試劑不要混用。
避免長時間打開蓋子以及長時間暴露于光下。
2、不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
3、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存。
4、加入試劑的順序應(yīng)一致。
elisa試劑盒按照標(biāo)簽說明書選用正確的貯存辦法,在運(yùn)用之前要恢復(fù)到室溫。并且稀釋往后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)該丟掉,不要再去保存。
上海琛藝elisa試劑盒提供免費(fèi)代檢測服務(wù),我們將在短時間內(nèi)將檢測報告交給您!本公司是國內(nèi)的、的科研試劑供應(yīng)單位,產(chǎn)品齊全,*上海elisa試劑盒,培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體等試劑產(chǎn)品。專業(yè)經(jīng)銷ELISA試劑盒多年,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障!
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