原代細胞(Primary Cell)是指從機體的組織或器官經(jīng)胰蛋白酶、膠原酶、中性蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體環(huán)境培養(yǎng)的細胞。一般認為,培養(yǎng)的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
原代細胞不僅廣泛應用于分子生物學、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè),如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等;原代細胞在生物醫(yī)藥領域有不可替代性作用。
上海琛藝實業(yè)有限公司是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑的生物試劑企業(yè),提供人、大鼠、鼠、雞兔、豬、兔等近600種原代細胞。我們致力于打造專業(yè)的原代細胞研發(fā)和服務平臺,做“您身邊的細胞培養(yǎng)專家”。
兔肺微血管內皮原代細胞
一、產(chǎn)品簡介
1. 產(chǎn)品名稱:兔肺微血管內皮細胞
2. 組織來源:肺組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4. 細胞簡介:
兔肺微血管內皮細胞分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。微血管內皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。
本公司生產(chǎn)的兔肺微血管內皮細胞采用組織貼塊法并結合內皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶;細胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息:
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用兔肺微血管內皮細胞*培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)兔肺微血管內皮細胞的培養(yǎng)基。
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,兔肺微血管內皮細胞可傳3-5代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,置于37℃5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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