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液相色譜領(lǐng)域HPLC、UHPLC和UPLC的區(qū)別

來源:依利特(大連)分析儀器有限公司   2019年07月10日 09:05  
HPLC(High Performance Liquid Chromatography):液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學、醫(yī)學、工業(yè)、農(nóng)學、商檢和法檢等學科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。

UPLC(Ultra Performance Liquid Chromatography):色譜理論認為提高色譜柱的效能(efficiency)就能增加儀器的解析度(resolution),而運用粒徑低于2μm的小顆粒無疑是增加效能的好方法。但減小固定相的粒度以增加色譜柱效能一直的色譜儀器科學的瓶頸,因為小顆粒不僅要求系統(tǒng)能承受高于目前極限壓力(比如9000psi),需要更小的系統(tǒng)體積(死體積),并且需要能適應可能只有幾秒峰寬的高速檢測器。UPLC具有超低擴散體積(小于15μL)可盡可能發(fā)揮亞2μm色譜柱性能。色譜工作者使用UPLC結(jié)合小顆粒色譜柱可以獲得更好的分離度,靈敏度,更快的分析速度。
 
UHPLC: (Ultra-High Performance Liquid Chromatography):UHPLC的誕生是UPLC 對色譜分離技術(shù)帶來的一系列變化之一。UHPLC在制造技術(shù),擴散體積和耐受壓力方面進行了優(yōu)化,使之能夠匹配2.5~3.5μm顆粒度的柱子,大限度發(fā)揮色譜性能。采用顆粒更小的固相不僅可以實現(xiàn)更高的分辨率,同時還能縮短整體分析時間。

三者的區(qū)別在于:

  HPLC UHPLC UPLC
擴散體積 >30μL 15 - 30 µL < 15 µL
色譜柱 3.0-4.6 mm內(nèi)徑3-10 µm顆粒選擇代表:4.6mm內(nèi)徑, 5µm 2.1-4.6 mm內(nèi)徑1.7-5 µm顆粒選擇代表:3.0 mm內(nèi)徑,2-3.5μm 實心核顆粒色譜柱 1.0-4.6 mm內(nèi)徑1.6-5 µm顆粒選擇代表:2.1 mm內(nèi)徑,亞2μm
高耐壓 <6,000 PSI ≥9,000 PSI ≥15,000 PSI


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