抗體粗純化試劑盒的操作程序和結(jié)果判斷

來源：山東藍(lán)都生物科技有限公司 2019年07月25日 17:22

抗體粗純化試劑盒的操作程序：

1.洗滌液配制用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液（2號液）按1：10稀釋，如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。

2.樣本稀釋用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清樣本按1：100稀釋，如取5ul樣本與495ul樣本稀釋液，混勻。陰性、陽性對照品不用稀釋，直接加樣。

3.加樣反應(yīng) 每次試驗設(shè)陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔(分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿工作洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘后再甩凈，拍干。

4.加酶反應(yīng) 除空白對照孔外，每孔加酶結(jié)合物(1號液) 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。

5.顯色反應(yīng) 加底物液(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴，混勻，37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴，終止反應(yīng)（加終止液后，藍(lán)色會變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。

抗體粗純化試劑盒的結(jié)果判斷：

以空白對照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。待檢樣本孔A值大于等于陰性對照A值的3.1倍者判為陽性。如陰性對照A值低于0.1時按0.1計算。

抗體粗純化試劑盒的注意事項：

1.抗體粗純化試劑盒于2-8℃保存，每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

3.抗體粗純化試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號抗體粗純化試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清或血漿。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

6.37℃孵育時，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時用不干膠膜封蓋板孔。

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