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elisa試劑盒的用途及組織結(jié)構(gòu)

來(lái)源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2019年08月05日 16:14  

 elisa試劑盒的用途:
ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或者抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或者抗體任然保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或者抗體即保留其免疫學(xué)活性,又保留了酶的活性,在測(cè)定時(shí)受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或者抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他的物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或者抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或者定量分析。由于酶的催化效率很高,間接的放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可以用于測(cè)定抗體。

ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu):
一、血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后,1000*g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離。

二、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

三、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

四、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

五、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒成分

一、預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

二、 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

三、標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 

四、 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

五、顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

六、 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

七、終止液: 1N硫酸 12mL x 1

八、濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)

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