Diol二醇基色譜柱的設(shè)計(jì)和保養(yǎng)
Diol二醇基色譜柱采用*的設(shè)計(jì),以高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì),通過采用高純度鍵合試劑,很大限度實(shí)現(xiàn)單層官能團(tuán)覆蓋和*的殘余硅醇基封尾,含碳量可高達(dá)8.8%。該填料為均一的球形顆粒,孔徑為80 Å和120 Å,比表面積300m2/g。1,2-二羥基丙醚鍵合相的極性特征對(duì)于極性化合物有著較強(qiáng)的保留。通過運(yùn)用*的勻漿裝填技術(shù)裝填得到的Diol柱柱床密度均一穩(wěn)定,因此可保證具有很好的柱效。
Diol二醇基色譜柱一般用于多肽、蛋白和極性藥物分子等分離。此外,Diol柱還可以體積排阻機(jī)理用于生物分離過程中。
Diol二醇基色譜柱的保養(yǎng):
pH
避免在pH低于2或高于9的條件下使用HP-Cyano柱。較高的pH會(huì)溶解硅膠,從而使部分或全部的氰丙基鏈從硅膠表面脫落,引起分離效率的降低和保留時(shí)間的改變。為了獲得很好的分離效果和延長(zhǎng)柱的使用壽命,請(qǐng)盡量使用pH在2-8范圍內(nèi)的流動(dòng)相。
壓力
盡管Diol二醇基色譜柱可在高至5000psi的壓力下使用,但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?000psi。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來(lái)源于流速,因此流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言,柱壓會(huì)隨著色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下,建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。
溫度
操作溫度為60 oC。長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作也會(huì)損壞色譜柱,這種情形在高的pH條件下特別突出。
儲(chǔ)藏
長(zhǎng)期不用時(shí),請(qǐng)不要讓水或緩沖液存留在色譜柱中。在替代緩沖液時(shí),請(qǐng)用至少20-30倍柱體積的50%甲醇水溶液沖洗色譜柱,再用20-30倍柱體積的純有機(jī)溶劑如乙腈等進(jìn)行沖洗。每根色譜柱在運(yùn)輸過程中均會(huì)附有兩個(gè)可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸,請(qǐng)用堵頭塞緊色譜柱的兩端。
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