中文名稱：倉鼠ELISA試劑盒

規(guī)格：96T/48T

檢測波長:450nm

所需樣本體積：50-100ul

適用范圍：僅供科研

庫存：現(xiàn)貨

保存及有效期:2-8℃,六個月

檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。

例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦斧液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。

琛藝供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELSA試劑盒等

上海琛藝實業(yè)長期代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、豬、雞、犬、猴子、羊、牛等種屬elisa實驗。

倉鼠ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。下面分析ELISA試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法。
一、選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；

2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 

3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 

2) 加樣后及時放入孵箱。 

3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 

4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 

5) 標本較多時，請分批操作。
三、 孵育
可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 

2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：
1) 貼封片或加蓋； 

2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
四、洗板
ELISA試劑盒可能原因：
1) 采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉。 

2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。

 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 

2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
五、顯色
可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 

2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。
elisa試劑盒研發(fā)解決辦法： 

1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 

2) 加樣時保持顯色劑不外流； 

3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
六、終止
可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
七、讀板
如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸； 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
ELISA試劑盒在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。

一：ELISA試劑盒查驗技師應(yīng)具有從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能嫻熟操作實驗儀器、器械，具有一定總結(jié)和剖析疑問的才華，對ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外狀況能及時妥善解決。
二運用校對過的微量移液器，打掃天然差錯。移液器準確與否對定量查看尤為主要。
三：仔細閱讀說明書嚴厲按照說明書懇求進行規(guī)范化操作。不一樣批號的試劑不可混用。值得改進的本地，重復(fù)實驗斷定樹立后才華改進。
四：ELISA試劑盒洗刷*
洗板不*，酶聯(lián)絡(luò)物本底顯色會出現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳腐的洗刷液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也或許出現(xiàn)假陽性。
五：嚴控反響時間
反響時間過長，酶失活；反響時間過短，酶聯(lián)絡(luò)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分聯(lián)絡(luò)，生成物結(jié)構(gòu)懈怠不健壯，簡單洗掉，都或許構(gòu)成假陰性。
六：過保存期的試劑不能運用
留意ELISA試劑盒保存期，過保存期的試劑不能運用。
七：評估試劑的實用性
試劑的穩(wěn)定與否，對準確率的高低到頭主要。在試劑啟用前，應(yīng)進行陰、陽對照及樣品重復(fù)比照實驗。
顯色時間過短，參與中止液反響中止后，底物聯(lián)絡(luò)物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。逾越顯色懇求時間后顯色，應(yīng)判為假陽性，這或許與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當即顯色，不可報陽性，這或許是本底顯色的效果。

檢測ELISA試劑盒樣本時，該如何處理

  血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫?yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。

    有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、xue塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。