C18液相色譜柱是一種的分析手段,液相色譜柱是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”,由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質(zhì)復雜,色譜柱極易被強保留物質(zhì)污染。這些強保留物質(zhì)通常難以洗脫,多次上樣后,聚集在柱頭端,堵塞篩板,甚至可能與填料發(fā)生相互作用導致填料變性,這會導致柱效下降,分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象。因而液相色譜柱的維護是十分必要的。
C18液相色譜柱的維護詳解:
1.色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得較大的"補償",而且色譜柱的壽命也會變得更長!操作步驟:
a.平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)
b.如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。
2.色譜柱的再生
長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫ιV柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。
C18液相色譜柱具有的性能。即使對于非常難分離的堿性化合物,也可獲得出色的峰形,從而改善了這些類型的樣品的柱效和分離度。由于在硅膠制造和鍵合技術(shù)方面進行了改進,因此能夠獲得這樣優(yōu)異的性能,并且這些技術(shù)*由安捷倫控制。
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