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豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒操作步驟

來源:生物試劑   2019年09月27日 16:19  

豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒操作步驟

豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒樣品準備】

 

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

 

豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒檢驗方法】

 

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。

6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌,同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。

 

【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。

 

【檢驗結(jié)果的解釋】

1.樣品A值0.38為陽性;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。

2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應(yīng)疫苗。

 

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