人胰淀粉酶(PAMY)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:
ELISA試劑盒規(guī)格:
(1)96T可用做84個(gè)標(biāo)本,12個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)48T可用做42個(gè)標(biāo)本,6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;
ELISA試劑盒組成:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應(yīng)終止液。
保存條件:2-8℃低溫保存;
保質(zhì)期:六個(gè)月;
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
人胰淀粉酶(PAMY)ELISA試劑盒使用建議
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
ELISA試劑盒廠家招代理商,科研ELISA試劑盒測定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題及可能的原因
問 題 可能的原因(非試劑盒本身的原因)
1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2.測定的重復(fù)性差 (相同樣本兩次測定結(jié)果不一致) 這是典型的由測定操作引起的問題,包括
(1)加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;
(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染;
(3)加錯(cuò)樣本;
(4)加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);
(5)不同批號(hào)試劑盒中組分混用;
(6)溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;
(7)孔內(nèi)污染雜物;
(8)酶標(biāo)儀濾光片不正確;
(9)血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
3.白板
(陽性對照不顯色) (1)漏加酶結(jié)合物;
(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。
(3)漏加顯色劑A或B;
(4)終止劑當(dāng)顯色劑使用。
4.全部板孔均有顯色 (1)洗板不干凈;
(2)顯色液變質(zhì);
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
不論ELISA試劑盒儀器售后有多好,也很難做到工程師隨叫隨到,因?yàn)楣こ處焸兺枪局衵ui忙碌的人。要是酶標(biāo)儀報(bào)錯(cuò)無法使用,而我們的實(shí)驗(yàn)又等不了怎么辦?據(jù)資深工程師介紹,其實(shí)他遇到的大多數(shù)維修問題都是很簡單的。
以下就是一些酶標(biāo)儀報(bào)錯(cuò)的常見兩點(diǎn),這些實(shí)用小標(biāo)簽一定可以幫你成為動(dòng)手達(dá)人,一解實(shí)驗(yàn)室的燃眉之急。
*、酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器,ELISA試劑盒強(qiáng)光自然會(huì)有巨大影響,所以是不能放在窗邊的。
第二、別擔(dān)心,儀器多半不是大毛病,只不過被大型離心機(jī)影響了。大功率設(shè)備產(chǎn)生的磁場會(huì)干擾其他電器,此外振蕩也會(huì)影響酶標(biāo)儀微孔板中的液面高度,導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。
【ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中遇到的各種疑問】
1,水質(zhì)原因:點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證,用娃哈哈礦泉水代替
2,實(shí)驗(yàn)操作原因:
吸取到其它相吹干,準(zhǔn)確的取液吹干
離心不*,延長離心時(shí)間
樣本的污染,更換樣本
乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現(xiàn)象
3,儀器試劑原因:
離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具
有機(jī)溶劑的影響,做試劑空白看影響結(jié)果
4,衍生化試劑原因(長時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑
5,與曲線好壞相關(guān),保證曲線的正常
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽性高
樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
空白管在實(shí)驗(yàn)中被污染,實(shí)驗(yàn)中防止交叉污染
水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替
2.偏高
添加量不準(zhǔn)確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量多,準(zhǔn)確的取液吹干
取到其它相層液體,取需用相吹干
復(fù)溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復(fù)溶液
3.偏低
添加量不準(zhǔn)確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量少,準(zhǔn)確的取液吹干
復(fù)溶液稀釋錯(cuò)誤或加入量多,正確的稀釋復(fù)溶液
而用ELISA檢測抗體,已獲得對多種傳染病和寄生蟲病的血清學(xué)診斷,亦開始廣泛用于現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查。在寄生蟲病方面,它用于對瘧原蟲、阿米巴、利日曼原蟲、錐蟲、血吸蟲、囊蟲、弓漿蟲、肺吸蟲、肝吸蟲、血絲蟲、旋毛蟲病等血清學(xué)診斷,這對人醫(yī)和獸醫(yī)都很重要。在病原微生物方面已用于檢測鏈球菌、沙門氏菌、布氏桿菌、結(jié)核桿菌、麻瘋桿菌、霍亂弧菌、淋球菌、假絲酵母菌等的抗體,還可用于破傷風(fēng)抗毒素和霍亂弧菌抗毒素的測定以及檢測斑疹傷寒立克次氏體感染后的抗體作診斷,也可用于對立克次氏體的種屬鑒別,還有用于檢測鸚鵡熱衣原體抗體的報(bào)導(dǎo)。ELISA也可應(yīng)用于以下病毒抗體檢測:流感病毒、腮腺炎病毒、麻診、風(fēng)疹、輪狀病毒、皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、腺病毒、腸道病毒、腦炎病毒、黃熱病毒、狂犬病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒等,其敏感性都超過目前常用的檢測方法。此外,還可用于鑒定病毒型別,例如皰疹病毒。在免疫性疾病方面有試用作自身疫病抗體測定以及對過敏的診斷,例如檢測各種過敏原的抗體、DNA抗體及甲狀腺球蛋白抗體,紅斑性痕瘡抗體等等。在衛(wèi)生學(xué)方面,可用于檢測食品中葡萄球菌腸毒素及沙門氏菌毒素等等。
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