RM-1細(xì)胞|RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞 

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣　 
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng) 
特征特性 CHO-HCV-C細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因，能穩(wěn)定表達(dá)C蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。 
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-C培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS　 
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代 
傳代情況 C15 
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　 
細(xì)胞周期分為細(xì)胞間期和細(xì)胞分裂期，細(xì)胞間期較長(zhǎng)，而細(xì)胞分裂期較短。
細(xì)胞間期是為細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備時(shí)期，表現(xiàn)為細(xì)胞增大，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)增多。細(xì)胞分裂期則是一個(gè)細(xì)胞由兩個(gè)細(xì)胞分解為一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。
細(xì)胞是生命的基本單位，細(xì)胞的特殊性決定了個(gè)體的特殊性，因此，對(duì)細(xì)胞的深入研究是揭開(kāi)生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細(xì)胞生物學(xué)已經(jīng)成為當(dāng)代生物科學(xué)中發(fā)展快的一門(mén)學(xué)科，是生物、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專(zhuān)業(yè)的一門(mén)必修課程。
依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基， 混 合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)

凍存細(xì)胞接收后的處理：

1.干冰運(yùn)輸，收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇；
2.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請(qǐng)立即拍照后與我們聯(lián)系。

復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理：

1.收到細(xì)胞后，請(qǐng)首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請(qǐng)立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細(xì)胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當(dāng)天不要消化處理，如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒(méi)有反饋相關(guān)問(wèn)題，出現(xiàn)的細(xì)胞問(wèn)題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù)。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1. 細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
   ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
   ②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
   ③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
   ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
   ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
   ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
   2、細(xì)胞復(fù)蘇：
   ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
   ②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
   3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
   ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
   ②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
   ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
   ④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

2. RM-1細(xì)胞|RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞 -如何培養(yǎng)該細(xì)胞?

   細(xì)胞培養(yǎng)是當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究與生物工程中基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

   細(xì)胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn)、藥物研制與腫瘤防治等醫(yī)學(xué)實(shí)踐提供了全新的手段。細(xì)胞培養(yǎng)包括原核生物細(xì)胞，入細(xì)菌;真核單細(xì)胞生物，入酵母菌、四膜蟲(chóng)等;植物細(xì)胞與細(xì)胞的培養(yǎng)以及于此密切相關(guān)的病毒的培養(yǎng)。

   細(xì)胞培養(yǎng)

   體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞(primary culture cell)與傳代細(xì)胞(subculture cell)。原代細(xì)胞是指機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)，適應(yīng)在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱(chēng)為傳代細(xì)胞。

   分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi))就貼附在瓶壁上，這就稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。

   分散呈圓球形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開(kāi)始有絲分裂，逐漸形成致密的細(xì)胞單層，稱(chēng)為單層細(xì)胞(sigle layer cell),這種培養(yǎng)方法稱(chēng)為單層細(xì)胞培養(yǎng)。

   對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

   如果漂浮的死細(xì)胞多，說(shuō)明細(xì)胞有很多老化的，建議每次傳代的時(shí)候，在用胰酶消化之前，用PBS將細(xì)胞漂洗一遍，胰酶消化的時(shí)間要把握好，37℃2-3min即可，及時(shí)終止反應(yīng)，否則胰酶消化過(guò)度對(duì)細(xì)胞損傷較大，也會(huì)有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動(dòng)作要輕柔。

   體外培養(yǎng)的細(xì)胞，不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài)：成纖維樣細(xì)胞(fibroblast like cell)與上皮樣細(xì)胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動(dòng)的游走細(xì)胞。