·         產(chǎn)品名稱： DCS細胞|DCS小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞

·         產(chǎn)品編號： CL0028

·         細胞數(shù)量： 1*10^6

·         細胞來源： atcc

·         組織來源： 胸主動脈平滑肌

·         細胞種屬： 大鼠源

·         生長特性： 貼壁

·         培養(yǎng)基： DMEM+10%FBS

·         形態(tài)特征： 成纖維細胞

·         傳代方法： 1:2 - 1:3

·         培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃

·         細胞描述： 當培養(yǎng)物達到穩(wěn)定期時，細胞表現(xiàn)出酶肌激酶和肌酸磷酸激酶（CPK）的活性增加。 肌肉型CPK在細胞分裂停止后合成。

·         細胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）

·         細胞運輸： 干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

DCS細胞|DCS小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞-細胞操作說明
請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。
一、 收貨
<1>本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T25瓶、離心管、血清及干冰。
① T25是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T25瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)（有條件可以拍下此時細胞照片）。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6mL培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。
② 離心管是用15mL離心管發(fā)貨的方式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及平衡參考上述T25瓶。平衡完成后，離心（1000rpm，3min）收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
③ 血清是用牛血清直接發(fā)貨的形式，是細胞凍存管加入含有細胞的牛血清的形式。收到細胞后，拆開自封袋，凍存管表面噴75%酒精消毒后，在超凈臺中打開凍存管，將細胞用1mL槍頭輕輕幾次以將細胞吹勻，接種至含有預熱的培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶或皿中，顯微鏡下觀察細胞是否吹勻，如果沒有吹勻，繼續(xù)吹勻至3-5個細胞一團，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
④ 干冰是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
<2>相關問題
① 如不能在收到細胞后及時操作細胞，T25及離心管發(fā)貨的細胞可以消毒后在37度過夜，血清發(fā)貨的細胞可以在室溫下靜置1-2天（注意不要放冰箱），干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未*升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰*升華，請即刻復蘇細胞。
② T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心（1200rpm，5min）后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。
③ 部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍在加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心（1000rpm，3min）收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。