細(xì)胞名稱(chēng) ：c918細(xì)胞|c918人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性 上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格 1×10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件 MEM+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)條件 氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

背景資料 初認(rèn)為這個(gè)細(xì)胞源自喉上皮癌，但隨后通過(guò)同功酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn)，起源細(xì)胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。

c918細(xì)胞|c918人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞常規(guī)說(shuō)明：

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液

細(xì)胞質(zhì)檢情況：不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請(qǐng)務(wù)必重視。

一、 細(xì)胞復(fù)蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來(lái)，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動(dòng)。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來(lái)噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。

2. 把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來(lái)），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來(lái)。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動(dòng)，使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。

4. 標(biāo)好細(xì)胞種類(lèi)和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。

5. 3天換一次培養(yǎng)基。

二、Hs888Lu人肺成纖維細(xì)胞

1. 培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。

2. 把原有培養(yǎng)基吸掉。

3. 加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細(xì)胞就行），消化1-2分鐘。

4. 細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5. 用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。

6. 把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。

8. 根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)把細(xì)胞傳到幾個(gè)培養(yǎng)皿中。一般，癌細(xì)胞分5個(gè)，正常細(xì)胞傳3個(gè)。繼續(xù)培養(yǎng)。

三、Hs888Lu人肺成纖維細(xì)胞凍存

把細(xì)胞消化下來(lái)并離心（同上）。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來(lái)，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫(xiě)明細(xì)胞種類(lèi)，凍存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃過(guò)夜，然后放到液氮灌中保存。

凍存液的配制： 70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

要注意的就是無(wú)菌操作！

Hs888Lu人肺成纖維細(xì)胞脂肪細(xì)胞在能量?jī)?chǔ)存和代謝過(guò)程中有著重要的作用。
脂肪細(xì)胞分化是一個(gè)發(fā)展的過(guò)程，它對(duì)代謝穩(wěn)態(tài)和營(yíng)養(yǎng)信號(hào)很重要。
它由復(fù)雜的過(guò)程控制，如基因表達(dá)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。
前脂肪細(xì)胞存在于成人脂肪組織中，能根據(jù)能量的平衡增殖和分化成熟的脂肪細(xì)胞。
前體細(xì)胞的增殖和分化能夠增加脂肪組織的體積。
在體外培養(yǎng)中，不同的組織來(lái)源前脂肪細(xì)胞的油脂含量，成脂轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)和TNFalpha誘導(dǎo)的凋亡均有不同。
同時(shí)研究表明它還與脂肪分化以及許多生理病理過(guò)程密切相關(guān)，如脂肪代謝、能量平衡、肥胖、糖尿病、高血脂和乳癌。

HS683 人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞）<7210>人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟提取于內(nèi)臟脂肪組織，<7200>人脂肪細(xì)胞-皮下提取于人皮下脂肪組織，*代凍存，每管含有細(xì)胞數(shù)>1×106 cells/ml，此細(xì)胞通過(guò)CD44, CD90免疫熒光染色和脂肪染色驗(yàn)證，經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。 

推薦培養(yǎng)基:（PAM, Cat. No. 7211）