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國產(chǎn)液相色譜應(yīng)用是用于分離植物色素，其方法是這樣的：在一玻璃管中放入碳酸鈣，將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時，玻璃管的上端立即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗，隨著石油醚的加入，譜帶不斷地向下移動，并逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶，繼續(xù)沖洗就可分別接得各種顏色的色素，并可分別進(jìn)行鑒定。色譜法也由此而得名。
現(xiàn)在的色譜法早已不局限于色素的分離，其方法也早已得到了極大的發(fā)展，但其分離的原理仍然是一樣的。我們?nèi)匀唤兴V分析。
一、色譜分離基本原理：
由以上方法可知，在色譜法中存在兩相，一相是固定不動的，我們把它叫做固定相；另一相則不斷流過固定相，我們把它叫做流動相。
國產(chǎn)液相色譜的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的。使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡，液相色譜使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。
國產(chǎn)液相色譜操作要求：
1、液相開機(jī)前先檢查洗針液、柱塞清洗液是否足夠；
2、液相開機(jī)后，首先確保柱塞清洗運(yùn)行，再執(zhí)行其它操作。
3、開機(jī)排氣時，有“purge”閥的儀器應(yīng)先打開“purge”閥再開泵以5ml/min的流速排氣，關(guān)“purge”閥的時候先把流速降到 1ml/min再關(guān)，切不可吧順序弄反，否則系統(tǒng)壓力會瞬間變高。
4、使用自動進(jìn)樣器時，建議啟用“洗針進(jìn)樣”方式，以降低樣品殘留，對于有些強(qiáng)殘留的物質(zhì)可以選擇降低濃度或減小進(jìn)樣量。
5、國產(chǎn)液相色譜系統(tǒng)壓力高時考慮色譜柱堵了，如果將液相色譜換成兩通壓力依舊高，考慮系統(tǒng)管路某部分堵了。管路堵的情況下可以使用熱水清洗。對堵塞的通道可以用熱水清洗。
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