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NUTU-19-LUC大鼠卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2019年10月25日 12:02  

 

產(chǎn)品名稱:NUTU-19-LUC大鼠卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時通知銷售人員,我們將盡快為您解決!

NUTU-19-LUC大鼠卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

  •  
  • 三、細(xì)胞生長條件:

 

  • 組成:

組份

數(shù)目

細(xì)胞

 1 T-25瓶

細(xì)胞說明書

一份

  • 細(xì)胞簡介:

生長特性:

貼壁生長

 

細(xì)胞來源:

從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)

培養(yǎng)條件:

培養(yǎng)基:90%1640培養(yǎng)基 +10%FBS(推薦BI  -04-001-1ACS*胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37℃

培養(yǎng):

  • 貼壁細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代;

2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進(jìn)行傳代,第yi次傳代比例為1:2。

3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第yi次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。

 

二、懸浮細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基);

3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時,對其進(jìn)行傳代,第yi次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。

 

細(xì)胞總數(shù):

1~3*106

傳代周期:

2-3天

傳代比例:

1:2~1:4

換液頻率:

2-3天

凍存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項:

1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

3 對于貼壁細(xì)胞,若大部分細(xì)胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,表明細(xì)胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。

4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,不免費對后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。

 

做細(xì)胞實驗的同學(xué)看過來。

選擇上海琛藝生物細(xì)胞有3個理由:

1、細(xì)胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;

2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;

3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實驗,效果更佳。

 

 

專業(yè)技術(shù)人員萬工收藏的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:

1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者上海琛藝。一般上面會有針對細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。

5. 對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住,是每天。

上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

 

 

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