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H22細(xì)胞|小鼠肝癌22(H22)

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2019年10月28日 10:38  

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

產(chǎn)品名稱:H22細(xì)胞|小鼠肝癌22(H22)

包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)通知銷售人員,我們將盡快為您解決!

  • H22細(xì)胞|小鼠肝癌22(H22)
  • 三、細(xì)胞生長條件:

 

  • 組成:

組份

數(shù)目

細(xì)胞

 1 T-25瓶

細(xì)胞說明書

一份

  • 細(xì)胞簡介:

二、 細(xì)胞培養(yǎng)及傳代
<1>細(xì)胞培養(yǎng)
① 細(xì)胞請于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),大部分細(xì)胞是37℃,5% CO2,濕度100%環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細(xì)胞培養(yǎng)條件不一致,請仔細(xì)閱讀相應(yīng)的細(xì)胞說明書,使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件;
② 細(xì)胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng),加入適量說明書上標(biāo)注的細(xì)胞相應(yīng)*培養(yǎng)基(一般液面高度2-3mm即可)。
<2>細(xì)胞傳代(以下步驟適用于10cm皿)
① 細(xì)胞培養(yǎng)至密度達(dá)80%以上時(shí)即可傳代,先將細(xì)胞培養(yǎng)基取出3mL用15mL離心管裝好,其他培養(yǎng)基全部吸干舍棄;
② 培養(yǎng)皿加入2-3mL無菌PBS,輕輕晃動(dòng)皿,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍棄;
③ 加入1mL胰酶,輕輕晃動(dòng)皿,使胰酶浸沒到皿底所有部位,將皿蓋好放入培養(yǎng)箱中消化;
④ 3min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞不再貼壁,即可加入di一步收集的培養(yǎng)基混勻;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至不貼壁為止;
⑤ 將細(xì)胞懸液均勻分成幾份,分別加入不同培養(yǎng)皿中,補(bǔ)加新培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
<3>相關(guān)問題
① 部分細(xì)胞在傳代后時(shí),會有以下現(xiàn)象:細(xì)胞內(nèi)會有黑色小點(diǎn)、細(xì)胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細(xì)胞或者細(xì)胞長的極慢。出現(xiàn)以上現(xiàn)象時(shí),可以咨詢本公司技術(shù)人員此現(xiàn)象是否正常及相關(guān)處理方式,不要頻繁換液,大多數(shù)細(xì)胞1周換液2-3次即可。
② 細(xì)胞碎片較多、背景較臟時(shí),貼壁細(xì)胞用PBS漂洗兩次、懸浮細(xì)胞打散后低速離心(900rpm,3min)能有效改善。
③ 傳代比例建議1:2-1:3,長得比較快的細(xì)胞可以1:3,比較慢的按1:2傳代。傳代后,建議不要使用傳代前培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基,會有大量細(xì)胞碎片甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡的風(fēng)險(xiǎn)。
④ 細(xì)胞狀態(tài)不好或者生長極慢的時(shí)候,可以通過增加血清濃度調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)及生長速度。
⑤ 請不要隨意更換培養(yǎng)基,因?qū)嶒?yàn)需要,可以逐步馴化。
懸浮傳代:混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞懸液900-1000rpm離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細(xì)胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗一次。

 

四、注意事項(xiàng):

1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

3 對于貼壁細(xì)胞,若大部分細(xì)胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,表明細(xì)胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。

4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時(shí)間我段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,不免費(fèi)對后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。

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