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人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2019年10月29日 10:04  

中文名稱:人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒

規(guī)格:96T/48T

檢測波長:450nm

所需樣本體積:50-100ul

適用范圍:僅供科研

庫存:現(xiàn)貨

保存及有效期:2-8℃,六個(gè)月

檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。

例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦斧液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

琛藝供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELSA試劑盒等

上海琛藝實(shí)業(yè)長期代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、豬、雞、犬、猴子、羊、牛等種屬elisa實(shí)驗(yàn)。

人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。下面分析ELISA試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法。
一、選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;

2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 

3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 

2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 

3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 

4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 

5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
三、 孵育
可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 

2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
解決辦法:
1) 貼封片或加蓋; 

2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
四、洗板
ELISA試劑盒可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 

2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。

 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 

2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
五、顯色
可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑; 

2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。
elisa試劑盒研發(fā)解決辦法: 

1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 

2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流; 

3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
六、終止
可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
七、讀板
如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
ELISA試劑盒在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。

一:ELISA試劑盒查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和剖析疑問的才華,對ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外狀況能及時(shí)妥善解決。
二運(yùn)用校對過的微量移液器,打掃天然差錯(cuò)。移液器準(zhǔn)確與否對定量查看尤為主要。
三:仔細(xì)閱讀說明書嚴(yán)厲按照說明書懇求進(jìn)行規(guī)范化操作。不一樣批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的本地,重復(fù)實(shí)驗(yàn)斷定樹立后才華改進(jìn)。
四:ELISA試劑盒洗刷*
洗板不*,酶聯(lián)絡(luò)物本底顯色會出現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許出現(xiàn)假陽性。
五:嚴(yán)控反響時(shí)間
反響時(shí)間過長,酶失活;反響時(shí)間過短,酶聯(lián)絡(luò)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分聯(lián)絡(luò),生成物結(jié)構(gòu)懈怠不健壯,簡單洗掉,都或許構(gòu)成假陰性。
六:過保存期的試劑不能運(yùn)用
留意ELISA試劑盒保存期,過保存期的試劑不能運(yùn)用。
七:評估試劑的實(shí)用性
試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭主要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品重復(fù)比照實(shí)驗(yàn)。
顯色時(shí)間過短,參與中止液反響中止后,底物聯(lián)絡(luò)物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。逾越顯色懇求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這或許與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不可報(bào)陽性,這或許是本底顯色的效果。

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