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農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)
農(nóng)藥殘留量檢測(cè)是微量或痕量分析,必須采用高靈敏度的檢測(cè)技術(shù)才能實(shí)現(xiàn)。自20世紀(jì)50年代,各國(guó)科學(xué)家就開始研究農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。常規(guī)檢測(cè)的分析方法有光譜法、酶抑制法和色譜法。
光譜法
光譜法是根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥中的某些官能團(tuán)或水解、還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在特定的環(huán)境下發(fā)生氧化、磺酸化、絡(luò)合等化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的顏色反應(yīng)來進(jìn)行定性或定量測(cè)定。檢出限在微克級(jí)。它可直接檢測(cè)固體、液體及氣體樣品,對(duì)樣品前處理要求低、環(huán)境污染小,分析速度快。但是,光譜法只能檢測(cè)一種或具有相同基團(tuán)的一類有機(jī)磷農(nóng)藥,靈敏度不高,一般只能作為定性方法。
酶抑制法
酶抑制法是根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿的活性,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累,影響正常神經(jīng)傳導(dǎo),使昆蟲中毒致死這一昆蟲毒理學(xué)原理進(jìn)行檢測(cè)的。根據(jù)這一原理,通過將特異性抑制膽堿酯酶(ChE)與樣品提取液反應(yīng),若ChE受到抑制,就表明樣品提取液中含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯農(nóng)藥。
色譜法
色譜法是農(nóng)藥殘留分析的常用方法之一,它根據(jù)分析物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)的不同達(dá)到分離目的,并將分析物質(zhì)的濃度轉(zhuǎn)換成易被測(cè)量的電信號(hào)(電壓、電流等),然后送到記錄儀記錄下來的方法。主要有薄層色譜法、氣相色譜法和液相色譜法。
薄層色譜法
薄層色譜法(ThinLayerChromatogra2phy,TLC)是一種較成熟的、應(yīng)用也較廣的微量快速檢測(cè)方法,20世紀(jì)60年代色譜技術(shù)的發(fā)展,使薄層色譜法在農(nóng)藥殘留分析中得到廣泛應(yīng)用。薄層色譜法實(shí)質(zhì)上是以固態(tài)吸附劑(如硅膠、氧化鋁等)為擔(dān)體,水為固定相溶劑,流動(dòng)相一般為有機(jī)溶劑組合而成的分配型層析分離分析方法。
氣相色譜法
氣相色譜法(GC)是在柱層析基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型儀器方法,是色譜發(fā)展中為成熟的技術(shù)。它以惰性氣體為流動(dòng)相,利用經(jīng)提取、純化、濃縮后的有機(jī)磷農(nóng)藥(Ops)注入氣相色譜柱,升溫氣化后,不同的Ops在固定相中分離,經(jīng)不同的檢測(cè)器檢測(cè)掃描繪出氣相色譜圖,通過保留時(shí)間來定性,通過峰或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照來定量,具有即定性又定量、準(zhǔn)確、靈敏度高,并且一次可以測(cè)定多種成分的柱色譜分離技術(shù)[4]。
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(Gaschromatography2massspectrum,GC2MS)技術(shù)是農(nóng)藥殘留研究強(qiáng)有力的工具。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用是將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀串聯(lián)起來作為一個(gè)整體的檢測(cè)技術(shù)。樣本中的殘留農(nóng)藥通過氣相色譜分離后,對(duì)它們進(jìn)行質(zhì)譜的從低質(zhì)量數(shù)到高質(zhì)量數(shù)的全譜掃描。根據(jù)特征離子的質(zhì)荷比和質(zhì)量色譜圖的保留時(shí)間進(jìn)行定性分析,根據(jù)峰高或峰面積進(jìn)行定量,不但可將目標(biāo)化合物與干擾雜質(zhì)分開,而且可區(qū)分色譜柱無法分離或無法*分離的樣品。
液相色譜法
液相色譜法(High2performanceliquidchromatogra2phy,HPLC)是以液體為流動(dòng)相,利用被分離組分在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的差異實(shí)現(xiàn)分離,是在液相色譜柱層析的基礎(chǔ)上,引入氣相色譜理論并加以改進(jìn)而發(fā)展起來的色譜分析方法。
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LiquidChromatography2MassSpectrum,LC2MS)是利用內(nèi)噴射式和粒子流式接口技術(shù)將液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)接起來的方法。LC在分離方面非常有效,而MS允許分析物在痕量水平上進(jìn)行確認(rèn)和確證。C2MS對(duì)簡(jiǎn)單樣品具有幾乎通用的多殘留分析能力,檢測(cè)靈敏度高,選擇性好,定性定量可同時(shí)進(jìn)行,結(jié)果可靠。主要用于分析熱不穩(wěn)定、分子量較大、難于用氣相色譜分析的樣品,是農(nóng)藥殘留分析中很有力的一種方法。[3]
快速檢測(cè)技術(shù)
但是傳統(tǒng)的GC/MS等農(nóng)殘分析技術(shù)檢測(cè)成本高、時(shí)間長(zhǎng)，這就給食品安全監(jiān)管部門對(duì)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后的監(jiān)督工作帶來了許多不便，因此也催生出大量的快速農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)，常見的有化學(xué)速測(cè)法、免疫分析法、酶抑制法和活體檢測(cè)法等。
化學(xué)速測(cè)法，主要根據(jù)氧化還原反應(yīng)，水解產(chǎn)物與檢測(cè)液作用變色，用于有機(jī)磷農(nóng)藥的快速檢測(cè)，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質(zhì)干擾。
免疫分析法，主要有放射免疫分析和酶免疫分析，常用的是酶聯(lián)免疫分析(ELISA)，基于抗原和抗體的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)，對(duì)于小分子量農(nóng)藥需要制備人工抗原，才能進(jìn)行免疫分析。
酶抑制法，是研究成熟、應(yīng)用廣泛的快速農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)，主要根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酶的特異性抑制反應(yīng)。
活體檢測(cè)法，主要利用活體生物對(duì)農(nóng)藥殘留的敏感反應(yīng)，例如給家蠅喂食樣品，觀察死亡率來判定農(nóng)殘量。該方法操作簡(jiǎn)單，但定性粗糙、準(zhǔn)確度低，對(duì)農(nóng)藥的適用范圍窄。
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