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雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(TRAIL)ELISA試劑盒實驗原理

來源:生物試劑   2019年11月11日 16:13  

雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(TRAIL)ELISA試劑盒實驗原理及實驗步驟

雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(TRAIL)elisa試劑盒實驗原理

植物纖維素酶試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(TRAIL)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(TRAIL)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(TRAIL)elisa試劑盒操作步驟

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

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