SW480細(xì)胞| 人結(jié)腸癌細(xì)胞SW-480 含STR鑒定
SW480細(xì)胞| 人結(jié)腸癌細(xì)胞SW-480 含STR鑒定
細(xì)胞名稱 | SW480 [SW-480](人結(jié)腸癌細(xì)胞) |
種屬 | 人 |
年齡(性別) | 男;50歲 |
組織來源 | 直腸;結(jié)直腸腺癌 |
生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景描述 | SW480 [SW-480]細(xì)胞源自原位直腸腺癌,和SW620細(xì)胞源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。CSAp和直腸抗體3陰性;角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代,309位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代。細(xì)胞p53蛋白表達(dá)水平提高,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽性,癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。SW480 [SW-480]細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞溶解酶,一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。有報道稱,SW480 [SW-480]細(xì)胞表達(dá)GM-CSF。SW480 [SW-480]細(xì)胞ras原癌基因的12位密碼子有一個突變,可以用作PCR法檢測該突變的陽性對照。1978年11月,A·Leibovitz將其提交給ATCC時已傳代至第91代。 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM高糖(貨號:PM150210)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120) |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
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1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者上海琛藝。一般上面會有針對細(xì)胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細(xì)胞,還是別人惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存,凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。
5. 對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住,是每天。
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