上海琛藝實業(yè)有限公司elisa試劑盒生產(chǎn)廠家，檢測種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨等。種屬齊全，現(xiàn)貨直銷。產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月，我司elisa試劑盒為*批次現(xiàn)貨供應(yīng)    提供免費待測業(yè)務(wù)。

人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒特點：

一、、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學檢。

人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被蛋白酶(PMN Elastase)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛋白酶(PMN Elastase)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

酶標儀（450nm）

高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

37℃恒溫箱

人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒注意事項

  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

人多形核白細胞彈性蛋白酶（PMN Elastase）ELISA試劑盒組成

名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、1、2、4、8、16μmol/L試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法

 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

人多形核白細胞彈性蛋白酶（PMN Elastase）ELISA試劑盒操作步驟：
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；樣本孔加待測樣本50μL。

樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷 繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應(yīng)OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
人多形核白細胞彈性蛋白酶（PMN Elastase）ELISA試劑盒性能：

 準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

 靈敏度：*檢測濃度小于0.1μmol/L。

 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

 有效期：6個月